本课题以新一代溶栓物质纳豆激酶为模型药物，对纳豆激酶的分离纯化、酶学性质、缓释片的制备及其稳定性进行了系统研究。 采用TAME法作为纳豆激酶活性的测定方法，操作简单、快速，在纳豆激酶的浓度范围为0.015-0.25mg/ml内线性关系良好，精密度较高，重现性好。 对纳豆激酶的分离纯化进行了研究，纳豆激酶发酵液的粗提物经Superdex 75凝胶层析和PAGE电泳纯化，可得到纳豆激酶的纯品，经SDS-PAGE电泳检验为单一色带，分子量为28kDa。 研究了纳豆激酶的酶学性质，在30℃以下，纳豆激酶的活性能较好地保持，当温度高于40℃时，酶活开始下降，表明温度对纳豆激酶的活性有显著影响；纳豆激酶的最适稳定pH为6-10，而在pH<4时，纳豆激酶很容易失活，表明纳豆激酶在酸性条件下不稳定。 考察了影响纳豆激酶酶促反应动力学的因素，纳豆激酶以TAME为底物时的米氏常数(Km)为35.47mmol/L，最适反应温度为37℃，最适反应pH为8.0。 本课题选用HPMC、骨架材料A为骨架材料制备了能在体外持续释放12h的纳豆激酶缓释片，对影响缓释片释放的因素：骨架材料和稀释剂的种类及用量进行了考察。通过正交试验设计对处方进行优化，得到了优选处方。体外释放机理研究结果表明，纳豆激酶缓释片的体外释放行为符合威布尔方程。 纳豆激酶缓释片稳定性影响因素试验表明，强光照射对纳豆激酶缓释片无显著影响；高湿度会导致片剂外观的改变和释放度的变化。加速试验(25℃)表明，25℃长期储藏会影响纳豆激酶缓释片的释放度和活性，提示纳豆激酶缓释片宜低温保存。研究表明，纳豆激酶原料的临界相对湿度为82.30％，纳豆激酶缓释片的临界相对湿度为83.63％，确定了纳豆激酶生产和储藏的湿度条件。 本课题对新型溶栓物质——纳豆激酶的分离纯化、酶学性质、缓释片的制备及其稳定性进行了系统研究，目前尚未见关于纳豆激酶口服缓释制剂的报道。本课题的研究结果为纳豆激酶缓释片的进一步开发奠定了良好的基础，同时也为生物技术药物口服缓释制剂的发展提供了参考方法和思路。