豆科植物与根瘤菌之间共生固氮关系的建立，需要寄、宿主双方对对方信号的接受和反馈。豆科植物释放类黄酮，根瘤菌接受类黄酮信号之后诱导结瘤相关基因表达，并分泌结瘤因子;豆科植物在感知结瘤因子信号之后，开启信号转导网络，启动共生结瘤相关基因的表达，最终形成共生体—根瘤。百脉根中感知结瘤因子信号的是两个LysM类受体激酶NFR1/NFR5，并向下游效应基因传递结瘤因子信号。尽管我们知道其下游的效应基因是SYMRK，但是如何传递的机制不清楚。研究表明ROP6与NFR5相互作用，并通过调节侵入线的发育正调控结瘤。　　本研究主要内容包括：⑴以ROP6为诱饵蛋白，通过酵母双杂交技术从百脉根AD-cDNA文库中筛选分离到网格重链蛋白CHC2，体外pull-down实验和烟草叶片双分子荧光互补实验进一步证实了ROP6与CHC2的相互作用。用生物信息学的方法分析CHC2的结构，并根据结构将CHC2截成9个不同大小区段，鉴定出与ROP6相互作用的结构域。⑵克隆百脉根另一个CHC基因—CHC6以及几个百脉根小G蛋白，利用酵母双杂交实验分别验证与ROP6及CHC2的相互作用，结果表明在百脉根中CHC2与ROP6彼此的相互作用是特异性的。⑶克隆百脉根CLCs基因，酵母体内分析显示CHC2与CLCs都有相互作用。选取相互作用强的CLC1，在体外做CHC2、CLC1与ROP6三个蛋白的竞争关系实验，结果显示CLC1能竞争ROP6与CHC2的相互作用。⑷用real-time PCR技术分析CHC2的时空表达，CHC2在所有组织中都有表达，接种根瘤菌之后表达量有微量变化。⑸用农杆菌介导的转化，单独定位CHC2和共定位CHC2/NFR5。CHC2在接种前定位在细胞膜，接种之后早期在囊泡，之后向根毛顶端运动，在侵入线形成时位于尖端和侵入线。共定位显示，接种之前，CHC2/NFR5共定位于细胞膜上，接种之后共定位在囊泡。⑹对CHC2 RNAi分析显示，转基因植株结瘤数量明显减少。