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目的：
通过临床观察明确芪莲合剂加减方对晚期非小细胞肺癌气虚痰湿型患者生存状态、生活质量及免疫功能的影响。通过体外实验研究芪莲合剂中主要活性成分黄芪甲苷基于ILT4-PI3K/Akt-B7-H3通路抑制非小细胞肺癌免疫逃逸的机制。
方法：
1.选择符合纳入标准的气虚痰湿型的ⅢB-Ⅳ期非小细胞肺癌患者80例，随机分为单纯化疗组和联合化疗组，每组各40例。单纯化疗组给予AP或DP方案单纯化疗治疗，联合化疗组在化疗基础上给予芪莲合剂加减方治疗，进行4周期化疗，化疗期间中药不停药，服用至第四周期结束后第二天。观察记录治疗前后患者的实体瘤疗效、免疫功能影响、中医证候积分、生活质量评分等情况，以及两组治疗期间发生不良反应的状况。
2.选用非小细胞肺癌A549细胞株进行实验，通过MTT药物毒性实验测定药物黄芪甲苷对A549细胞的半数抑制率IC50，并进行MTT细胞增殖实验观察药物浓度、作用时间对细胞增殖的影响。将A549细胞分为空白组（即不加药物干预）、黄芪甲苷低剂量组（药物干预浓度为1/2倍IC50值）、黄芪甲苷中剂量组（药物干预浓度为IC50值）、黄芪甲苷高剂量组（药物干预浓度为2倍IC50值），分别干预培养。干预后细胞提取总蛋白和mRNA进行Western blot实验和qRT-PCR实验，检测黄芪甲苷对ILT4-PI3K/Akt-B7-H3通路中各因子蛋白及mRNA的表达的影响。
结果：
1.（1）临床观察过程中两组均有脱落病例，最终单纯化疗组38例、联合化疗组37例进行比较。两组治疗前，在性别、年龄、临床分期、病理分型及各观察指标方面均无明显差异（P＞0.05）。（2）经过4个疗程的分组治疗，联合化疗组与单纯化疗组相比，在实体瘤疗效上虽然两组患者并无明显差异（P＞0.05），但联合化疗组的客观缓解率和疾病控制率均高于单纯化疗组。（3）芪莲合剂加减方联合化疗治疗能更好的稳定患者体重（P＜0.05）；治疗后联合化疗组的肿瘤标志物检测CEA、CYFRA21-1、CA-125都比单纯化疗组更低（P＜0.05）；芪莲合剂加减方联合化疗治疗缓解了化疗对免疫功能的抑制，联合化疗组血常规检测WBC、LY％、Hb均比单纯化疗组高（P＜0.05），且联合化疗组T淋巴细胞亚群测定中CD4+/CD8+也比单纯化疗组高（P＜0.05）。（4）芪莲合剂加减方联合化疗治疗提高患者中医证候总评分，尤其是在咳嗽咳痰、胸闷气短、乏力自汗症状缓解上更有优势（P＜0.05），而单纯化疗组却可加重乏力、自汗、食欲不振及便溏症状；联合化疗组在患者功能状态和体力状况方面均优于单纯化疗组（P＜0.05）；联合化疗组患者PFS比单纯化疗组更长（P＜0.05）；且联合化疗组发生化疗副作用的更少，症状更轻（P＜0.05）。
2.通过体外实验，进行MTT药物毒性及细胞增殖实验，证明黄芪甲苷能有效抑制A549细胞增殖，并且其作用时间越长抑制作用越强（P＜0.05），作用浓度越高抑制作用越强（P＜0.05），从而计算出黄芪甲苷对A549细胞影响的IC50值约为28.415μmol/L。通过Western blot及qRT-PCR实验，从蛋白水平和mRNA水平上证明黄芪甲苷可以抑制ILT4-PI3K/Akt-B7-H3通路中个因子表达水平，且以中剂量作用最显著（P＜0.05）。
结论：
1.芪莲合剂加减方联合化疗治疗非小细胞肺癌（气虚痰湿型）患者总体疗效优于单纯化疗治疗，芪莲合剂加减方联合化疗不仅改善症状，稳定体重，还能缓解化疗对患者免疫功能的抑制，提高生活功能状态及体力状况，延长患者疾病无进展生存时间，而且可以减轻患者不良反应，降低化疗对患者的毒副作用。
2.通过体外实验证明黄芪甲苷能抑制A549细胞增殖，抑制作用具有与时间及浓度有关。黄芪甲苷明显降低ILT4的水平，抑制PI3K/Akt通路，减少B7-H3的表达，从而认为其可以达到抑制NSCLC免疫逃逸的作用。
通过临床观察明确芪莲合剂加减方对晚期非小细胞肺癌气虚痰湿型患者生存状态、生活质量及免疫功能的影响。通过体外实验研究芪莲合剂中主要活性成分黄芪甲苷基于ILT4-PI3K/Akt-B7-H3通路抑制非小细胞肺癌免疫逃逸的机制。
方法：
1.选择符合纳入标准的气虚痰湿型的ⅢB-Ⅳ期非小细胞肺癌患者80例，随机分为单纯化疗组和联合化疗组，每组各40例。单纯化疗组给予AP或DP方案单纯化疗治疗，联合化疗组在化疗基础上给予芪莲合剂加减方治疗，进行4周期化疗，化疗期间中药不停药，服用至第四周期结束后第二天。观察记录治疗前后患者的实体瘤疗效、免疫功能影响、中医证候积分、生活质量评分等情况，以及两组治疗期间发生不良反应的状况。
2.选用非小细胞肺癌A549细胞株进行实验，通过MTT药物毒性实验测定药物黄芪甲苷对A549细胞的半数抑制率IC50，并进行MTT细胞增殖实验观察药物浓度、作用时间对细胞增殖的影响。将A549细胞分为空白组（即不加药物干预）、黄芪甲苷低剂量组（药物干预浓度为1/2倍IC50值）、黄芪甲苷中剂量组（药物干预浓度为IC50值）、黄芪甲苷高剂量组（药物干预浓度为2倍IC50值），分别干预培养。干预后细胞提取总蛋白和mRNA进行Western blot实验和qRT-PCR实验，检测黄芪甲苷对ILT4-PI3K/Akt-B7-H3通路中各因子蛋白及mRNA的表达的影响。
结果：
1.（1）临床观察过程中两组均有脱落病例，最终单纯化疗组38例、联合化疗组37例进行比较。两组治疗前，在性别、年龄、临床分期、病理分型及各观察指标方面均无明显差异（P＞0.05）。（2）经过4个疗程的分组治疗，联合化疗组与单纯化疗组相比，在实体瘤疗效上虽然两组患者并无明显差异（P＞0.05），但联合化疗组的客观缓解率和疾病控制率均高于单纯化疗组。（3）芪莲合剂加减方联合化疗治疗能更好的稳定患者体重（P＜0.05）；治疗后联合化疗组的肿瘤标志物检测CEA、CYFRA21-1、CA-125都比单纯化疗组更低（P＜0.05）；芪莲合剂加减方联合化疗治疗缓解了化疗对免疫功能的抑制，联合化疗组血常规检测WBC、LY％、Hb均比单纯化疗组高（P＜0.05），且联合化疗组T淋巴细胞亚群测定中CD4+/CD8+也比单纯化疗组高（P＜0.05）。（4）芪莲合剂加减方联合化疗治疗提高患者中医证候总评分，尤其是在咳嗽咳痰、胸闷气短、乏力自汗症状缓解上更有优势（P＜0.05），而单纯化疗组却可加重乏力、自汗、食欲不振及便溏症状；联合化疗组在患者功能状态和体力状况方面均优于单纯化疗组（P＜0.05）；联合化疗组患者PFS比单纯化疗组更长（P＜0.05）；且联合化疗组发生化疗副作用的更少，症状更轻（P＜0.05）。
2.通过体外实验，进行MTT药物毒性及细胞增殖实验，证明黄芪甲苷能有效抑制A549细胞增殖，并且其作用时间越长抑制作用越强（P＜0.05），作用浓度越高抑制作用越强（P＜0.05），从而计算出黄芪甲苷对A549细胞影响的IC50值约为28.415μmol/L。通过Western blot及qRT-PCR实验，从蛋白水平和mRNA水平上证明黄芪甲苷可以抑制ILT4-PI3K/Akt-B7-H3通路中个因子表达水平，且以中剂量作用最显著（P＜0.05）。
结论：
1.芪莲合剂加减方联合化疗治疗非小细胞肺癌（气虚痰湿型）患者总体疗效优于单纯化疗治疗，芪莲合剂加减方联合化疗不仅改善症状，稳定体重，还能缓解化疗对患者免疫功能的抑制，提高生活功能状态及体力状况，延长患者疾病无进展生存时间，而且可以减轻患者不良反应，降低化疗对患者的毒副作用。
2.通过体外实验证明黄芪甲苷能抑制A549细胞增殖，抑制作用具有与时间及浓度有关。黄芪甲苷明显降低ILT4的水平，抑制PI3K/Akt通路，减少B7-H3的表达，从而认为其可以达到抑制NSCLC免疫逃逸的作用。