论文部分内容阅读
树突状细胞(DCs)是免疫系统中功能最强的抗原呈递细胞，是连接固有免疫和获得性免疫的桥梁。在体内，它起着双重作用，既能调节免疫应答，又能引导免疫耐受。在肿瘤免疫中，树突状细胞发挥着重要的作用，一方面，DCs在抑制肿瘤生长中发挥重要作用，另一方面，肿瘤的生长同样也对DCs乃至整个免疫系统的功能有着极其深刻的影响。本论文主要探讨了肿瘤相关miRNAs及其靶基因对树突状细胞功能的调节作用，这些结果将对肿瘤及其免疫相关疾病的治疗产生重要影响。主要结果: (1)通过建立体外肿瘤与树突状细胞共培养模型，运用基因芯片结合定量PCR，我们鉴定了在树突状细胞中与肿瘤相关的miRNAs，如miR-22，miR-128和miR-503。 (2)肿瘤相关miR-22和miR-503通过靶向YWHAZ和Bcl2信号途径调节树突状细胞的存活寿命。肿瘤可利用一系列的免疫抑制手段，例如减少树突状细胞的生存寿命，来减弱免疫反应并限制免疫疗效。我们发现肿瘤上调多个miRNA的表达，如miR-16-1、miR-22、miR-155和miR-503。这些肿瘤相关联的miRNA通过调控凋亡信号途径中的多个分子的表达来影响树突状细胞的存活。特别地，miR-22靶向调控YWHAZ来干扰PI3K/Akt和MAPK信号途径，而miR-503则下调Bcl2的表达。肿瘤相关联的树突状细胞中miR-22和miR-503表达量上升的后果是树突状细胞生存寿命的减少。因此，肿瘤相关联的miRNA可以通过靶向调控多种胞内信号分子使得肿瘤环境中的树突状细胞发生凋亡，利用miR-22和miR-503的抑制剂可能是改善树突状细胞抗肿瘤免疫治疗的一个新的策略。 (3)肿瘤相关miR-22通过靶向p38能够影响树突状细胞的功能。p38 MAPK作为MAPK信号通路中关键的一类，对于树突状细胞的成熟及激活等都具有至关重要的调节作用。研究发现，在树突状细胞中，miR-22通过作用于p38的3UTR来调节p38的表达，引起细胞因子IL-6分泌的增多，促使初naive T细胞向Th17方向分化，增加了机体对抗肿瘤的能力。研究揭示了miR-22可能作为抵抗疾病特别是肿瘤的免疫治疗的靶分子。 (4) miR-128通过靶向p38调控树突状细胞中IL-6的产生。我们首先利用生物信息学的方法预测了p38可能受到一系列microRNA的调控，进一步利用双荧光素酶报告载体系统证实了miR-128可直接作用于p38基因的3UTR并抑制p38的表达。而且，转染miR-128可以很显著地降低树突状细胞中p38的蛋白水平，进而引起细胞因子IL-6分泌的增多。这些研究结果为microRNA在自身免疫性疾病、肿瘤等多种疾病的发病与治疗研究中增添了新的依据。