【摘 要】
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目的：探讨三氧化二砷(AS2O3)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对小鼠肝癌H22细胞株抑制作用及皮下移植瘤的影响作用，为提高治疗肝癌的临床效果、降低毒性和克服耐药提供理论和实验依据。方法：实验Ⅰ：体外AS2O3联合5-FU对小鼠肝癌H22细胞株增殖、细胞凋亡的影响：1.MTT法检测药物对细胞生长的影响分别以不同浓度的AS2O3(终浓度为0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL)、5-FU
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目的：探讨三氧化二砷(AS2O3)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对小鼠肝癌H22细胞株抑制作用及皮下移植瘤的影响作用，为提高治疗肝癌的临床效果、降低毒性和克服耐药提供理论和实验依据。
方法：
实验Ⅰ：体外AS2O3联合5-FU对小鼠肝癌H22细胞株增殖、细胞凋亡的影响：
1.MTT法检测药物对细胞生长的影响分别以不同浓度的AS2O3(终浓度为0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL)、5-FU(终浓度为20mg/L)和以上各浓度AS2O3联合5-FU体外作用于小鼠肝癌H22细胞24h、48h、72h后，观察其对小鼠肝癌H22细胞增殖的影响，并计算细胞生长抑制率和两药物相互作用系数(CDI)：
2.TUNEL荧光染色法检测细胞凋亡情况单用AS2O3或5-FU，或不同浓度AS2O3(0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL)联合5-FU(20mg/L)作用于小鼠肝癌H22细胞24h、48h、72h后，荧光显微镜下观察各组细胞凋亡的情况并计算凋亡率；
实验Ⅱ：体内AS2O3联合5-FU治疗小鼠肝癌皮下移植瘤的初步研究：
1.成功建立昆明小鼠肝癌皮下移植瘤动物模型40只。按瘤体体积均衡的分为4组进行药物干预，依次为对照组(NS)、AS2O3组(AS2O30.2mg/kg)，5-FU组(10mg/kg)，AS2O3(0.2mg/kg)+5-FU(10mg/kg)组，每组10只，连续腹腔注射药物2周，停药后第二天处死动物，留取血液标本，解剖提取肿瘤标本。
2.分别测定比较各组小鼠肿瘤体积、HE染色观察肿瘤组织病理变化、增殖细胞核抗原(PCNA)测定和采用原位末端标记法(TUNEL法)观察肿瘤细胞凋亡情况、计算凋亡率，小鼠肝肾功能相关生化指标检测。
结果：
实验Ⅰ：体外AS2O3或5-FU单药对小鼠肝癌H22细胞有显著抑制增殖及诱导凋亡的作用，并呈一定的时间、浓度相关性。AS2O3联合5-FU后，对小鼠肝癌H22细胞的抑制增殖及诱导凋亡作用较同时间内相应单药组效果明显提高。计算两药相互作用系数(coefficientofdrugininteraction，CDI)值，各浓度AS2O3与5-Fu联合作用H22细胞24h和48h时，均为CDI＜1，作用72h时，均为CDI=1，说明两者在48h内具有协同作用，72h时为相加作用。
实验Ⅱ：各组肿瘤体积有明显差异(F=252.7，P＜0.01)，各药物干预组平均肿瘤体积均明显低于对照组，有统计学意义(P＜0.01)，同时AS2O3+5-FU组平均肿瘤体积显著低于单用AS2O3和5-FU组，有统计学意义(P＜0.01)，单用或联合AS2O3和5-FU后肿瘤体积缩小率分别为32.93％，64.56％和77.06％。AS2O3组细胞增殖指数显著低于对照组，有统计学意义(P＜0.05)，AS2O3+5-FU组细胞增殖指数显著低于对照组和AS2O3组，有统计学意义(P＜0.05)，虽低于5-FU组，但无显著差异(P＞0.05)；AS2O3组细胞凋亡率高于对照组，有统计学意义(P＜0.05)，AS2O3+5-FU组细胞凋亡率显著高于AS2O3组和5-FU组，有统计学意义(P＜0.05)，血清ALT、AST、Cr检测值治疗组均较对照组高，但无显著差异(P＞0.05)。
结论：
1.体外AS2O3和5-FU对小鼠肝癌H22细胞有明显地抑制增殖和诱导凋亡作用，并且呈时间和剂量相关性；联合应用后较相应单药组效果明显增强，在48h内两者具有协同作用，72h时两者作用相加。
2.体内AS2O3和5-FU联合应用能显著增强对小鼠肝癌皮下移植瘤的抑制作用，两者具有协同作用，机制可能与增强抑制细胞增殖和诱导凋亡有关。并未发现明显毒副作用。
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