【摘 要】
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支气管哮喘是一种以气道炎症和气道高反应性为基本特征的变态反应性疾病,其发病机制复杂,目前仍未完全明确,多种细胞因子和炎症介质参与其发生、发展的调节,并在气道重塑过程
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支气管哮喘是一种以气道炎症和气道高反应性为基本特征的变态反应性疾病,其发病机制复杂,目前仍未完全明确,多种细胞因子和炎症介质参与其发生、发展的调节,并在气道重塑过程中发挥重要的作用。T细胞可以定向分化为TH1、TH2细胞,正常情况下,TH1、TH2细胞保持相对平衡状态,哮喘发生时,存在TH1/TH2免疫平衡被打破的情况,TH2型免疫过度表达,TH1免疫应答减弱。近年来,越来越多的研究表明儿童的过敏性特征及哮喘发生率与其周围环境中细菌内毒素水平呈负相关。适量细菌毒素的接触,有望减少儿童过敏性疾病及哮喘的发生率,从而为哮喘的辅助治疗寻求新的靶点。细菌脂多糖(Lipopolysaccharide LPS)作为一种免疫调节剂,可以下调TH2型免疫应答。IL-4能诱导嗜酸性粒细胞、肥大细胞释放IgE,在哮喘速发相反应中发挥重要作用。IL-8可趋化炎症细胞的聚集,延长中性粒细胞的存活时间,加重肺损伤,还可与IL-3协同促进释放白三烯和组胺,介导不依赖IgE的变态反应,引起迟发型哮喘。目的本实验通过检测哮喘小鼠血清IL-4、IL-8及肺组织VEGF表达,探讨IL-4、IL-8及VEGF在哮喘发生发展及气道重塑过程中的作用,明确高剂量LPS干预对其影响,力求对支气管哮喘的预防及控制寻求新的手段,更好的改善哮喘患者的生活质量。实验方法27只健康清洁级雌性BALB/c小鼠,随机分为三组：对照组(A组)、哮喘组(B组)、高剂量LPS干预组(C组),每组9只。哮喘模型的建立：B组于实验第1天、第8天和第15天腹腔注射卵蛋白/氢氧化铝混悬液0.2 mL(含卵蛋白20μg,氢氧化铝1 mg)致敏,并每隔2天腹腔注射生理盐水1mL,第22天开始隔日腹腔注射1mL生理盐水,1h后应用2%OVA生理盐水雾化吸入激发,共激发7次,每次持续30 min。C组在致敏阶段每隔2天腹腔注射1 mL含100μg LPS溶液,激发阶段在每次激发前1h腹腔注射相同剂量浓度LPS。A组致敏与激发均以等量的生理盐水代替OVA/Al(OH)3混悬液、OVA、LPS.末次雾化结束后24小时内收集1mL全血,进行ELISA检测,摘取右肺中叶进行HE染色及VEGF免疫组化检测。所有实验数据均应用SPSS17.0进行分析。各组资料用均数±标准差(x±S)来表示,三组样本均数间的比较采用非参数检验,P<0.05时差异有统计学意义。结果1 HE染色结果哮喘组小鼠气道壁增厚,管腔狭窄变形,平滑肌层增厚,杯状细胞增生,气管周围炎性细胞浸润明显。高剂量LPS干预组气道壁增厚程度及炎症细胞浸润程度较哮喘组减轻,对照组肺组织结构基本正常。2免疫组化结果阳性表达呈现棕黄色,表达部位主要集中于气道上皮细胞、气道平滑肌细胞的胞浆。哮喘组小鼠肺组织VEGF呈强阳性表达,高剂量LPS干预组小鼠阳性反应较哮喘组少,而对照组呈弱阳性表达。3 ELISA的结果哮喘组血清IL-4、IL-8含量高于高剂量LPS干预组和对照组,差异有统计学意义,高剂量LPS干预组血清IL-4、IL-8含量与对照组相比,差异有统计学意义。结论1.高剂量LPS能减轻哮喘发作严重程度,减轻气道炎症2.高剂量LPS能减少气道血管重塑的发生
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