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背景:原发性支气管肺癌简称肺癌,肿瘤细胞原发于支气管粘膜或腺体,常有区域性淋巴结和血性转移,病情进展速度与细胞生物学特性有关。肺癌按组织病理学分类可分为非小细胞肺癌与小细胞肺癌,非小细胞癌占多数。肺癌作为世界上发病率最高的恶性肿瘤之一,其发病率以每年0.5%的速度增长。虽然近年来肺癌的诊治方法已取得较大的进展,但晚期肺癌五年生存率仍小于15%。目前肺癌在许多发达国家及我国许多大中城市的肿瘤发生中占居首位,严重威胁人民生命健康。近年来研究认为肺癌发生、发展是一个受多基因调控的、与细胞增殖和凋亡有关的复杂过程,具体机制目前不十分清楚。有研究表明,胸苷酸合酶(thymidylate synthase, TS)促进了一磷酸尿苷(deo- xyuridine-5′-monophosphate,dUMP)甲基化为一磷酸胸苷(deoxythymidine-5′-mono- phosphate ,dTMP),这是DNA生物合成的关键步骤。TS与多种恶性肿瘤的发生发展有关,是胸苷酸合成的限速酶。TS在正常组织中活性较低,而在多种肿瘤组织中活性明显增加。TS抑制剂是一类重要的抗肿瘤药物,5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil ,5-FU)正是其中一类经典化疗药物,5-FU进入体内后,经过酶促反应,转变5-氟尿嘧啶脱氧核苷(fluorodeoxyuridine monophosphate ,FdUMP),FdUMP与辅因子5,10-亚甲基四氢叶酸(5,10-methylenetetrahy drofolate ,mTHF)结合,再与TS结合形成稳定的三元络合物TS-FdUMP- mTHF,影响dUMP与TS的结合,抑制了dTMP的合成,使DNA的合成受限,导致细胞生长受到抑制甚至死亡。所以,TS被认为治疗恶性肿瘤过程中一个重要的靶目标。TS抑制剂是胃肠道肿瘤患者的经典化疗药物,但较少用于肺癌化疗。国内目前关于TS研究多集中于消化道肿瘤,而TS在肺癌中的表达在国内研究甚少。细胞增生核抗原(necleic proliferation related antigen ,Ki-67)是较早发现在增殖细胞中表达的一种核抗原,其蛋白在细胞核内阳性表达的高低与细胞增殖活性密切相关;是目前较为肯定的核增殖标志基因。在国外已有少数文献报道TS与Ki-67在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer ,NSCLC)中的表达,但对临床意义的认识存在分歧,在国内鲜见这方面的报道。本研究采用免疫组织化学(S-P)法检测52例NSCLC患者肿瘤组织中TS、Ki-67蛋白活性,旨在探讨两者的表达及临床意义,为TS的研究积累更多的资料,为TS抑制剂辅助治疗NSCLC提供相关的理论依据。目的:1 .检测TS、Ki-67在NSCLC癌组织中的表达水平;2 .探讨TS、Ki-67的表达与临床病理特征的关系;3 .观察TS、Ki-67在NSCLC癌组织表达水平的相关性。方法:我们采用免疫组织化学S-P法检测51例NSCLC术后病理标本中TS与Ki-67蛋白表达。TS以细胞浆有棕黄色颗粒为阳性,根据染色程度与文献分为高表达组和低表达组以及阴性组。而Ki-67蛋白以细胞核呈现棕黄色颗粒为阳性阳性细胞数少于25%为低表达,大于25%为高表达[2]。标记指数(labeled index ,LI)即:LI(%)=(阳性细胞数/计数肿瘤细胞总数)×100。运用医学统计软件spss10.0对TS、Ki-67蛋白表达与病人临床病理资料进行统计学分析。结果:1 .TS在非小细胞肺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系TS蛋白总的阳性为68.6%(35/51),鳞癌、腺癌、腺鳞癌分别为66.7%(14/21)、69.6%(16/23)、71.4%(5/7)。TS在病理类型中表达无统计学差异(P=0.971);比较不同分化程度肺癌组织,发现随着分化程度的降低,TS蛋白表达逐渐增高,统计学分析有意义( P<0.05);淋巴结已转移以及Ⅲ期患者TS表达阳性率均高于无淋巴结转移与Ⅰ/Ⅱ期患者,但无统计学差异( P>0.05)。TS表达与性别、年龄无相关性( P>0.05)。2 . Ki-67在非小细胞肺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系Ki-67总的阳性表达率为72.5%(37/51),鳞癌、腺癌、腺鳞癌分别为71.4%(15/21)、73.9%(17/23)、71.4%(5/7)。不同组织类型比较发现Ki-67与TS在各组别之间表达在统计学上无显著意义(P>0.05)。Ki-67的表达与患者年龄、性别无统计学差异,与肿瘤分化、分期、淋巴结转移有显著性差异(P<0.05)。3 . NSCLC患者TS与Ki-67表达相关性分析NSCLC患者TS表达强度与Ki-67表达强度存在显著正相关,经Spearman,s检验r=0.84,具有显著统计学意义(p<0.001)。TS阴性组、低表达组、高表达组的Ki-67平均标记指数显著升高,经两样本t检验,各组别均有统计学差异结论:1 .TS的表达与NSCLC细胞增殖、分化密切相关;2. Ki-67的表达NSCLC细胞增殖、分化、分期、淋巴结转移密切相关;3 . NSCLC患者TS表达强度与Ki-67表达强度显著正相关;4 .TS可能是NSCLC肿瘤细胞增殖指数的良好标记物