睾丸对于男性的生殖与发育有着重要的影响，它能够形成精子，使人类得以繁衍后代；能够维持男性第二性征，并促进男性生殖器官的发育。睾丸中存在三种主要细胞：生殖细胞、间质细胞、支持细胞。其中睾丸中支持细胞有很重要的作用，它能够分泌雄激素结合蛋白和抑制素，对于雄激素的分泌、运输起着重要的作用。　　1986年James Putney就提出了钙触发钙释放的观点—即SOCE。SOCE主要由位于质膜上的Orai蛋白和内质网膜上的STIM蛋白构成。STIM蛋白的N端有EF-Hand，位于内质网内，正常情况下与钙离子结合。当胞浆中的钙离子浓度降低时，EF-Hand就会释放钙离子，并同时作出反应，使STIM蛋白向Orai蛋白靠近，打开Orai通道，使细胞外的钙离子进入细胞内。　　近年来，SOCE及TRP通道在非兴奋细胞中的研究越来越得到重视。对于睾丸中存在的钙通道，大多数研究都集中在生殖细胞，其中生殖细胞的SOCE及TRP通道已有部分相关研究。在小鼠生殖细胞中，TRPC普遍存在于顶体反应区域，而小窝蛋白是构成生殖细胞SOCE重要的蛋白。但是，支持细胞中存在的钙通道多数集中在电压门控钙通道，有关支持细胞SOCE的研究较少。支持细胞是否存在SOCE并不清楚。　　在预实验中，小鼠睾丸支持细胞通过Western Blot研究，发现有Orai1蛋白和STIM1蛋白，即存在SOCE通道。为了进一步证明Orai1蛋白和STIM1蛋白，采用共聚焦技术也发现存在这两种蛋白的存在。通过质粒转染的方法，转染 luc、Yfp-EV作为对照，转染sho沉默小鼠支持细胞系中的Orai1，观察钙影像发现实验组的第二个峰要比对照组低，证明有较少钙离子进入细胞内。用低浓度的Gd3+抑制Orai1通道，发现支持细胞实验组比对照组的第二个峰值明显要低，也说明实验组有较少的钙离子进入。　　为了得到稳定的细胞系，通过luc、sho慢病毒感染支持细胞，用Puro筛选，最后得到luc和sho的单克隆细胞系。实验中分别用钙影像和Western Blot两种方法鉴定所挑选的单克隆细胞系：钙影像中sho组在加入EGTA+Tg后，再加入ca2++Tg后峰值比luc组低；Western Blot证明luc组Orai1蛋白比sho组高，说明sho组Orai1蛋白大部分被沉默。因此，钙影像的鉴定结果与Western Blot鉴定的结果一致，即表明所挑选的单克隆细胞系是成功的。最后将单克隆细胞系进行流式周期测定，通过比较各期（G1、G2、S期），发现luc组与sho组并没有明显区别。