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目的:探讨烟草中的主要毒性成分尼古丁(Nicotine;NIC)是否加重他克莫司(Tacrolimus;TAC)诱导的肾脏损伤。方法:体重约200-220克的雄性Sprague dawley大鼠32只随机分为4组,每日注射药物,共4周。具体分组如下:正常对照组(VH组;n=8):皮下注射橄榄油1 mL·kg-1;尼古丁组(NIC组;n=8):皮下注射橄榄油1 mL·kg-1和腹腔注射NIC 1.5 mg·kg-1;他克莫司组(TAC组;n=8):皮下注射TAC 1.5 mg·kg-1;他克莫司+尼古丁组(TAC+NIC组;n=8):皮下注射TAC 1.5 mg·kg-1和腹腔注射NIC 1.5 mg·kg-1。每日监测体重(Body weight,BW)并记录,4周的治疗结束后,将动物单独饲养在代谢笼中(Tecniplast,Gazzada,Italy),测量24小时饮水量(Water intake,WI)和尿量(Urine volume,UV),并采集大鼠的右侧颈内静脉血液样本,次日施行麻醉后获取大鼠肾脏组织样本,随后予以处死。采用定量酶学比色法(Roche Cobas 8000 Core ISE)测定血肌酐和血尿素氮;采用酶联免疫吸附测定(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒测定大鼠血清和尿中的可替宁;尿蛋白的测定采用酶学比色法(Modular DPP system,Roche);使用ELISA法测定血清和尿排泄中8-羟基脱氧鸟苷(8-Hydroxy-2’-deoxyguanosine,8-OHdG);使用高效液相-串联质谱法测定大鼠TAC血药浓度;Masson染色观察肾小管间质纤维化程度(Tubulointerstitial fibrosis,TIF);原位末端凋亡(TdT-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL)染色法观察凋亡细胞;过碘酸雪夫染色(Periodic acid-schiff stain,PAS)法观察肾小球病变;免疫组化法测定骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)和外胚层发育不良抗体(Ectodermal dysplasial,ED-1);使用免疫印迹法检测肾组织中的转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)、超氧化物歧化酶 1(Superoxide dismutase 1,SOD1)、B 淋巴细胞瘤-2 基因(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、NADPH 氧化酶 2(NADPH oxidase-2,NOX-2)、NADPH 氧化酶 4(NADPH oxidase-4,NOX-4)、超氧化物歧化酶 2(Superoxide dismutase 2,SOD2)、Bcl-2 相关X蛋白(Bcl2-associated X,Bax)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)的表达。结果:1.与VH组相比,NIC组和TAC组的血肌酐、血尿素氮、尿蛋白均升高(均P<0.05);与TAC组相比,TAC+NIC组的血肌酐、血尿素氮、尿蛋白进一步升高,均具有统计学意义(均P<0.05)。2.与VH组相比,NIC组和TAC组TIF程度、TGF-β1表达增加(均P<0.05);与TAC组相比,TAC+NIC组TIF程度、TGF-β1表达进一步增加,均具有统计学意义(均P<0.05)。3.与VH组相比,NIC组和TAC组肾小球系膜区面积扩大(均P<0.05);与TAC组相比,TAC+NIC组肾小球系膜区面积进一步扩大,均具有统计学意义(均P<0.05)。4.与VH组相比,NIC组和TAC组的ED-1阳性细胞数及OPN表达增加(均P<0.05);与TAC组相比,TAC+NIC组的ED-1阳性细胞数及OPN表达进一步增加,均具有统计学意义(均P<0.05)。5.与VH组相比,NIC组和TAC组的血清和尿排泄中8-OHdG增加,SOD1、SOD2表达降低,NOX-2、NOX-4表达增加,均具有统计学意义(均P<0.05);与TAC组相比,TAC+NIC组血清及尿排泄中8-OHdG进一步增加,SOD1、SOD2表达进一步降低,NOX-2、NOX-4表达进一步增加,均具有统计学意义(均P<0.05)。6.与VH组相比,NIC组和TAC组的Bcl-2/Bax比值降低,活化的Caspase-3增加,TUNEL 阳性细胞数增加(均P<0.05);与TAC组相比,TAC+NIC组Bcl-2/Bax 比值进一步降低,活化的Caspase-3进一步增加,TUNEL阳性细胞数进一步增加,均具有统计学意义(均P<0.05)。结论:NIC加重了他克莫司诱导的肾损伤,其机制可能与NIC加重氧化应激和细胞凋亡有关。