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目的肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)是介于细菌与病毒之间,无细胞壁的一类原核细胞型生物。它不但是原发性非典型肺炎的重要病原体,也是成年人社区获得性肺炎的常见病原之一。近年来由于肺炎支原体感染的发病率不断升高,使人们对早期、快速检测肺炎支原体感染的方法越来越重视。现在临床上常用的肺炎支原体分离培养和血清学方法敏感性低,特异性差,耗时长,易出现假阴性,不能很好的满足临床需要。近年PCR技术的发展,为建立可靠、快速的肺炎支原体早期诊断方法提供了可能。Dr.Jensen报道的touch-down PCR方法和Dr. Alfred报道的PCR方法是检测肺炎支原体感染较为常见的方法,具有较高的灵敏度和特异性。本研究通过IRS-PCR方法与Dr.Jensen和Dr.Alfred的PCR方法的比较,评价IRS-PCR在诊断肺炎支原体肺炎中的应用价值。方法1.标本来源：天津市某医院就诊的急性呼吸道感染患儿,共121例。由专业人员采集患儿咽拭子。从咽拭子中提取肺炎支原体DNA。2.用三种PCR方法对121例患者进行肺炎支原体检测。三种方法分别是IRS-PCR、DrJensen的PCR和Dr.Alfred的PCR方法。对三种方法检测结果有差异的标本进行测序。3.敏感性评价方法：用ddH2O10倍倍比稀释肺炎支原体标准菌株Mac提取的DNA,最终得到10个浓度递减的DNA样本,用三种PCR方法检测,可以判断三种方法的敏感性。4.特异性评价方法：以14种病原体的DNA为模板,分别用三种PCR方法扩增,用2%的琼脂糖凝胶电泳分析结果来判断这三种方法的特异性。结果1.IRS-PCR检出42例阳性患者,阳性率34.71%。Dr.Jensen的PCR检出46例阳性,阳性率38.01%,Dr.Alfred的PCR检出44例阳性,阳性率36.04%。三种PCR方法检测的结果不一致的标本：12、15、21和30,送测序,其结果为：12和15号标本阴性,21号和30号标本为阳性。2.IRS-PCR方法和Dr. Alfred的PCR方法的敏感性优于DrJensen的PCR方法。3.标准株Mac用IRS-PCR方法扩增,可扩增出503-525bp大小的特异性条带,大肠埃希菌用此法扩增出600bp左右大小的条带,因为大肠埃希菌扩增出的条带与目的条带大小差异大,距离比较远,不影响检测结果的特异性。DrJensen的PCR和Dr.Alfred的PCR除了标准株Mac扩出特异性条带外,其余病原体均未发现非特异性条带。三种方法均有高度的特异性。结论1.IRS-PCR方法与DrJensen和Dr. Alfred的PCR法比较,三种方法的检测结果的符合率高,方法一致性好,所以IRS-PCR可以用于临床肺炎支原体肺炎的诊断。2.IRS-PCR法操作简便,其特异性和敏感性也与上述两种方法没有差别,该法可以在国内推广。