论文部分内容阅读
近年来，板蓝根根腐病在一些产区发生逐年加重，成为板蓝根生产的限制因素之一。本文以板蓝根根腐病为研究对象，进行了病原菌的分离、致病性测定、种类鉴定、生物学特性研究以及抑菌中草药提取物的筛选试验。分别于2005年7月和2006年7月，从河北省唐山地区共采集108个板蓝根根腐病样品，分离获得172株分离物。按照柯赫氏法则，经形态学鉴定分别属于2属3个种：茄腐镰刀菌（Fusarium solani）、尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）和禾谷丝核菌（Rhizoctonia cerealis）。三者的分离频率依次为48.8％，44.2％和7％。为了进一步确定病原菌的分类地位，本研究对菌株P1、P2、P4和P5进行了ITS序列分析。结果表明：菌株P1与GenBank中尖孢镰刀菌（DQ459007）的同源性为100％，P2与禾谷丝核菌（AJ242887）同源性为100％，P4与茄腐镰刀菌（AY310442）的同源性为99％，P5与茄腐镰刀菌（AJ608989）的同源性为100％。对P1、P2、P4和P5供试4个菌株在不同温度、pH值、碳源、氮源、相对湿度条件下的菌落生长、产孢量、孢子萌发以及致死温度研究的结果表明，菌株P1在PDA培养基上菌落生长、产孢量和孢子萌发最适温度均为25℃，菌落生长和分生孢子萌发最适pH值均为6，产孢最适pH值为5，最适碳源为蔗糖，最适氮源为硝酸钠，在相对湿度低于90％时孢子不萌发，分生孢子致死温度为55℃。菌株P2在PDA培养基上最适生长温度为30℃，在pH值为6时生长速度最快，最适碳源为淀粉，最适氮源为硝酸钠。菌株P4、P5在PDA培养基上菌落生长和产孢最适温度均为30℃，孢子萌发最适温度为25℃，菌落生长、产孢和分生孢子萌发最适pH值均为7，最适碳源为乳糖，最适氮源为硝酸钠，相对湿度低于90％孢子不萌发，分生孢子致死温度为50℃。以菌株P4为靶标菌，测试了123种中草药提取物对菌落生长及分生孢子萌发的抑制作用。结果表明，提取物浓度为10mg/mL时，有99种提取物对菌落生长具有显著的抑制作用，其中TS-10、TS-42和TS-84的抑制率均大于50％，而且TS-10的抑制率达到了100％；有112种提取物对分生孢子萌发具有显著的抑制作用，其中10种提取物的抑制率在50％以上，而且TS-10和TS-11的抑制率达到100％。将抑制率大于50％的10种提取物稀释为5mg/mL，进行二次筛选，发现TS-42和TS-84两种提取物对菌落生长的抑制作用下降，而TS-10对菌落生长抑制率仍为100％，对分生孢子萌发抑制率为为74.50％。TS-10的抑制中浓度(EC50)为3.621mg/mL。