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第1章乙酰肝素酶基因表达与胃癌淋巴结转移关系的研究.目的:探讨最近被成功克隆的乙酰肝素酶基因在胃癌中的表达及其与临床病理因素之间的相互关系.方法:选用43例胃癌组织、10例癌旁正常胃组织,术后立即用RNA保存液RNAlater保存,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测标本中乙酰肝素酶mRNA表达,并结合患者的临床病理指标进行分析.统计学处理采用x<2>检验或四格表确切概率法、t检验,利用SPSS10.0软件完成.结论:(1)乙酰肝素酶mRNA阳性表达患者有较高的侵袭转移性.(2)乙酰肝素酶可能是胃癌侵袭转移中的一个重要酶,其表达与胃癌有无淋巴结转移、淋巴结转移的个数和淋巴结转移度都显著有关,可能参与胃癌的淋巴结转移.(3)乙酰肝素酶可能是胃癌预后的一个有用的分子标志物,有待生存分析作进一步的评价.第2章胃癌组织中乙酰肝素酶mRNA表达与CD44v6、MMP-7,nm23和Syndecan-1蛋白表达相关关系研究.目的:(1)探讨胃癌中CD44v6、MMP-7、nm23和Syndecan-1蛋白表达及其与临床病理因素之间的相互关系,尤其是淋巴结转移之间的关系.(2)探讨胃癌中乙酰肝素酶mRNA表达与CD44v6、MMP-7、nm23和Syndecan-1蛋白表达的相关关系.方法:选用43例胃癌组织及远离胃癌组织的正常胃粘膜组织在肿瘤切除后用10％中性福尔马林固定,常规HE染色,用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法(SP法)检测胃癌组织和正常胃粘膜的CD44v6、MMP-7、nm23和Syndecan-1蛋白表达情况.细胞有棕黄色为阳性细胞,其中CD44v6染色定位于细胞膜,而MMP-7和nm23染色定位于细胞浆.按阳性细胞所占比例分为(-):阳性细胞数小于10%;(+):阳性细胞数10%~50%;(++):阳性细胞数大于50%.Syndecan-1以细胞浆/细胞膜染有棕黄色为阳性细胞,按阳性细胞所占比例分为(-):阳性细胞数小于10%;(+):阳性细胞数10%~30%;(++):阳性细胞数30%~50%;(+++)阳性细胞数大于50%;为了便于统计学分析,我们将CD44v6、MMP-7和nm23归为阴性组和阳性组,而将Syndecan-1(-)和(+)归为低表达组,(++)和(+++)归为高表达组.统计学处理采用x<2>检验或四格表确切概率法、t检验;相关分析采用Kendall等级相关分析,利用SPSS10.0软件完成.结论:(1)首次证实胃癌中乙酰肝素酶mRNA表达与Syndecan-1蛋白表达程度之间具有显著的负相关关系,胃癌中Syndecan-1表达减少或缺失,可能与乙酰肝素酶活性的增高降解Syndecan-1分子胞外HS链有关,Syndecan-1可能是乙酰肝素酶作用的靶子.Ⅳ(2)CD44v6、MMP-7、nm23和Syndecan-1可能与胃癌的发生有关;CD44v6可能参与胃癌的侵袭转移,尤其是淋巴结转移;nm23可能参与胃癌淋巴结转移和腹膜转移的调节;Syndecan-1可能参与胃癌的进展和淋巴结转移.(3)MMP-7阳性表达的胃癌向周围组织直接浸润的能力增强,MMP-7可能主要是参与胃癌的浸润,而非转移.MMP-7促进胃癌侵袭可能是通过参与穿透基底膜(BM)和细胞外基质(ECM)的过程而不是促进胃癌细胞的增殖.(4)首次研究显示了乙酰肝素酶和MMP-7在胃癌中表达的正相关关系,提出它们在胃癌侵袭转移中是相互协同作用的可能性.乙酰肝素酶、CD44v6和MMP-7可能通过协同作用参与胃癌的侵袭转移.在胃癌中MMP-7可能通过CD44v6而补充到胃癌细胞膜上,进而协同促进胃癌的侵袭过程.第3章胃癌淋巴结转移预测的L0gistic回归分析.目的:通过对影响胃癌淋巴结转移因素的分析探讨较准确预测胃癌有无淋巴结转移标志.方法:应用RT-PCR方法对43例胃癌组织中的乙酰肝素酶mRNA进行检测,应用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法(SP法)检测胃癌组织中CD44v6、MMP-7、nm23和Syndecan-1蛋白表达情况并结合可能影响胃癌淋巴结转移的临床病理指标如年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、Borrmann分型、组织学类型、组织分化程度、有无浆膜浸润等运用二值多元Logistic回归分析寻找影响胃癌淋巴结转移的客观指标.结论:nm23、Syndecan-1蛋白阳性表达和有浆膜浸润的胃癌发生淋巴结转移的可能性较大;术前检测上述蛋白表达,术中结合有无浆膜浸润,对选择恰当的胃癌治疗方案有指导意义.术中若发现有浆膜浸润应重视胃癌淋巴结清扫的观点应该受到重视.