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分心木(Diaphragma juglandis Fructus)是胡桃科植物核桃果核内的干燥木质隔膜,也是一种传统中药材,《中药大辞典》记载其主要用于治疗肾虚、尿频、痢疾等疾病,现代医学研究表明分心木具有抑菌、补肾、抗氧化、抗肿瘤等药理功能。在日常生活中,人们常用来泡茶饮用。目前针对核桃分心木水提液化学成分及生理活性方面的研究鲜有报道。本文以核桃分心木水提液为研究对象,系统的研究了其易挥发性成分,建立了液质联用分析核桃分心木水提液化学成分的新方法,同时评价了分心木水提物体外抗肿瘤活性,并对其诱导癌细胞凋亡的分子机制进行了初步探索。主要研究内容及结论如下:(1)对核桃分心木水提液易挥发性成分进行了分析对核桃分心木水提液中易挥发性成分在4种不同萃取特性的固相微萃取头上的富集条件进行了选择,并对其在2种色谱柱(HP-5和RTX-WAX)上的分离条件进行了优化,建立了顶空固相微萃取(Head Space Solid-Phase Micro-Extraction,HSSPME)和气相色谱-质谱联用(Gas Chromatography-massspectrometry,GC-MS)的分析方法,并讨论了不同色谱柱和萃取头对分析其易挥发性成分的影响。通过对4种萃取头上的富集物经2种色谱柱分离后的质谱结果分析,确定结构的化合物共115种,其中醇类化合物21种、酯类化合物18种、酮类化合物15种、芳香族化合物14种、烃类化合物13种、醛类化合物12种、酸类化合物6种、酚类化合物5种、醚类化合物2种、其他类型化合物9种。主要易挥发性成分是乙酸、乙酸乙酯、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚、薄荷醇、雪松醇、2,3-丁二醇、1-己醇、苯乙醇、3-叔丁基-4-羟基苯甲醚、己醛、甘菊蓝。(2)对核桃分心木水提液难挥发物进行了液质联用分析对核桃分心木水提液难挥发物的液相色谱分离条件进行了选择,利用液相色谱-串联超高分辨率的精确质量四级杆-飞行时间质谱(HPLC-Q-TOF-MS)对核桃分心木水提液中难挥发、高沸点以及热稳定性差的化学成分进行了分析,建立了分心木化学成分分析的新方法。确定结构的有:没食子酸、儿茶素、槲皮苷、4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷和鞣花酸5种化合物。其中:槲皮苷、4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷、鞣花酸均为首次报道;该分析方法操作简单,灵敏度高,结果可靠。(3)对分心木水提物体外抗肿瘤活性及分子机制进行了初步探讨利用MTT法、流式细胞术评估了分心木水提物体外抑制HCT-116人直结肠癌细胞增殖的能力,结果表明:分心木水提物在浓度50~400μg/mL范围内,对癌细胞增殖抑制效果显著,且该效果呈剂量依赖性,其IC50值为(208.78±4.22)μg/mL。通过与结肠癌临床一线化疗药物5-氟尿嘧啶(5-FU)比较发现:同浓度下,分心木水提物抑制癌细胞增殖的能力相对较弱;在浓度100~400μg/m L范围内,与5-FU联合作用HCT-116癌细胞,二者之间具有协同作用;利用蛋白质印迹法(western blot)研究其诱导癌细胞凋亡的分子机制,结果表明:分心木水提物是通过内质网应激诱导癌细胞凋亡。