ROS对PC-3荷瘤小鼠肿瘤生长的影响及机制

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目的观察ROS对Pc一3荷瘤裸鼠移植瘤生长的影响,探讨ROS体内抑制肿瘤细胞增殖及其可能的机制。方法培养人前列腺癌Pc一3细胞至对数生长期,制备2x106/0.2ml单细胞悬液注射~1J28只裸鼠背部皮下,观察成瘤情况。将成瘤的裸鼠25只随机分为5组:A组:阴性对照组;B组:阳性对照组(维甲酸11 mg/kg):C组:ROS25 mg/kg组;D组:ROS50mg/kg组;E组:ROSl00mg/kg组。给药方式均为灌胃,隔日一次。40日后,处死裸鼠。①测量各组移植瘤的大小,计算抑瘤率。@HE染色后显微镜下观察实验组和对照组细胞形态及组织病理改变。③TUNEL检测实验组和对照组移植瘤细胞的凋亡情况,计算凋亡指数(AI)。@Western Blot检测实验组和对照组Caspase一3蛋白的表达。结果接种裸鼠28只,25只成瘤,成瘤率89.29%。①A、B、C、D、E组移植瘤体积分别为:(412.67+35.64)mm。、(123.46+14.23)mm3、(184.31+17.76)mm3、(146.69+10.62)mm3、(11531+9.83)mm3;各组抑瘤率分别为:0%、(70.08+7.9)%、(55.34+5.21)%、(64.45+6.89)%、(72.06+7.45)%。对比阴性对照组,各实验组肿瘤生长均受明显受到抑制。各实验组和阴性对照组问、不同实验组之间,差异部具有显著性(P<0.05);ROSl00mg/kg组与阳性对照组相比较差异无显著性(P>0.05)。@HE染色显微镜下观察:与阴性对照组比较,阳性对照组及各实验细胞数量减少、体积变小、胞质浓缩。@TUNEL检测并计算出:各组凋亡指数(AI)分别为(3.57+1.55)%、(14.32+0.98)%、(6.43+1.45)%、(11.77+1.84)%、(15.03+1.08)%。各实验组和阴性对照组问比较、各实验组之间两两比较,差异部具有显著性(尸l<0.05),且随着ROS浓度的增加,各实验组的AI升高。④Westernblot检测结果:各组灰度比值:(48.55+11351%、(100.64+8.911%、(63.50+10.83)%、(84.37+12.26)%、(98.62±10.92)%。各实验组和阴性对照组问比较、各实验组之间两两比较,差异部具有显著性(P<0.05),且随着ROS浓度的增加,各实验组的灰度比值升高,C.aspase-3表达上调。结论①2×106/0.2mlPC-3单细胞悬液种植在裸鼠的背部皮下有良好的成瘤性。②ROS可抑制人前列腺癌PC3裸鼠移植瘤生长,作用呈剂量依赖性。③ROS有诱导PC一3裸鼠移植瘤肿瘤细胞凋亡的作用,其机制可能与其上调Caspase-3的表达有关。
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