重组人参多肽的研究

被引量 : 2次 | 上传用户:jsj19871027
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
人参多肽(ginseng peptide)由14个氨基酸组成,是一种极具潜力的降血糖药物。 我们设计并合成了一段DNA序列作为目的基因片段,克隆进载体pBluescript后进行了核苷酸测序确定了序列的正确性。本研究选用了近年来日益被国际上认可的巴斯德毕赤酵母作为基因表达系统,分泌型质粒pPIC9为载体。首先,将pBluescript-gsp经限制型内切酶HindⅢ和Not Ⅰ酶切后与经同样酶切处理的pPIC9连接,形成重组质粒pPIC9-gsp。把pPIC9-gsp用Bgl Ⅱ酶切线性化后电穿孔转化入巴斯德毕赤酵母GSl15。经筛选得到hi~s+Mud~s表型的阳性克隆。小规模地培养重组菌株后进行目的蛋白的诱导表达,用Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳分析诱导液。目的蛋白是含有59个氨基酸,分子量为5.9kD的小肽。经酶切和凝胶电泳分析验证了分泌蛋白的正确性。 通过对诱导培养基中氮源的优化,目的蛋白的表达量由345mg/l提高到750mg/l。此外,批次发酵的研究表明重组菌株可用于重复5次连续发酵生产目的蛋白。 通过本研究,构建了结构正确的重组质粒pPIC9-gsp,筛选出了阳性克隆菌株,探索了目的蛋白的诱导表达与分析过程中的相关技术手段。并对发酵优化及相关方面做出了初探。
其他文献
随着社会变迁,人口老龄化的进程加快,大力发展社会养老保障已为一成种必然选择。农村养老问题日渐凸显,但目前的农村空巢老人的养老机制还存在一些问题,可以尝试从社会工作的
本文研究了一种新型的细粒锡石捕收剂——烷基亚磷酸酯对锡石的捕收性能和在锡石表面的吸附机理。结果表明,R为辛基、癸基和十二烷基的烷基亚磷酸酯都是锡石的有效捕收剂,其
制造技术的快速发展给离散型制造企业的发展带来了挑战,也带来了机遇。利用先进的制造技术和管理方法提高企业生产系统的生产能力、生产效率和快速响应市场的能力成为增强企
20世纪前期,乔基奥·莫兰迪(Gaogio Morandi,1890-1964)一直被作为现代艺术的边缘人物。批评界曾经把他看作一个保守主义画家,一个有着意大利文化品味的地方主义者,一个缺少时代
以中杂9号品种番茄为试材,采用菇渣、锯末和泥炭,按体积比组成四种有机基质配方(B1、B2、B3、B4),以混合基质(B5:炉渣:泥炭=3:2)为有机生态型无土栽培基质对照(CK1),以常规土壤栽培(B6)为基
随着国家经济的发展,工程建设规模日益扩大,大量新型的建筑结构和个性化建筑不断出现。建筑施工的手段和方法也随之发生了重大变化。以往采用的以经验为主的施工方法在这类工
随着水泥工业的进一步发展,不可再生资源和能源的消耗,废气和粉尘的大量排放,对环境造成的严重负荷已影响整个行业的可持续发展。“生态环境材料型”产业已成为国际水泥工业
我国高校社会工作实务课程的教学时常面临教学与实践分离的困境。笔者在《老年社会工作》课程教学中引入服务学习的理念和方法,将知识学习与社会服务相结合,以期在服务社会的
城市污水处理基础设施对于城市的发展起着一种不可替代的作用。城市污水处理设施直接关系着城市的环境和水资源,同时对城市经济、文化等有着重要的影响。中国城市经过近二十年
本论文以从炼厂干气中回收氢气分离过程为应用背景,以配制的氢气、氮气和甲烷混合气模拟炼厂干气,采用气体膜分离技术对从配制的混合气中回收氢气分离过程进行了研究,对气体