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癫痫是脑部神经元超同步化放电所导致的一组异质性疾病。内侧颞叶癫痫(mesial temporal lobe epilepsy, MTLE)是最常见的癫痫综合征之一,也是最常见的成年人药物难治性癫痫。海马硬化(hippocampal sclerosis, HS)是MTLE常见的病理表现,以海马区星形胶质细胞增生、神经元丢失、颗粒细胞散布和苔状纤维发芽为特征,但目前海马硬化的形成过程及MTLE发病的分子机制仍不清楚。近年来,研究发现Notchl信号通路对许多海马硬化中出现的或与之类似的病理表现有促进功能；在包括癫痫持续状态在内的损伤后神经再生过程中发挥作用,并能在神经元兴奋性增加时表达上调；在动物模型中发现,Notchl信号关键分子NICD1表达量在MTLE形成过程中上调,且MTLE患者手术切除的硬化海马中NICD1表达水平也存在上调。因此,选择Notchl信号通路研究其在海马硬化和MTLE发生中的作用,对理解疾病的发生过程具有重要意义。目的探讨Notchl信号通路的表达上调与HS-MTLE的形成是否有关；Notchl信号通路的激活是否推动了慢性期的自发癫痫发作。方法1.在C57BL/6小鼠右侧海马内植入电极-加药装置,同侧海马内注射Jaggedl激活Notchl信号通路(对照组BSA)或DAPT(对照组DMSO)抑制该通路后,海马内注射7ng海人酸构建HS-MTLE急性期模型,通过录像脑电图(video-electroencephalogram, vEEG)监测观察激活或抑制Notchl信号通路对急性期发作时间、次数和起始时间的影响。另一组小鼠右侧海马内注射200ng海人酸构建慢性期模型,右侧海马内植入电极-加药装置,通过vEEG监测确定稳定的发作基线后,右侧海马内注射Jaggedl,观察激活Notchl信号通路对慢性期发作时间的影响；洗脱期过后右侧海马内注射DAPT+Jaggedl,观察取消激活后慢性期的发作时间。2.以免疫荧光方法检测200ng海人酸模型5w时海马Notchl分子的分布。结果1.正常小鼠EEG表现为5-7Hz θ波；慢性期及急性期海人酸模型均出现高幅尖波、阵发性海马放电,及扩散至大脑皮层的发作；此外,急性期模型还出现阵发性棘慢波或多棘慢波综合、逐渐进展的高幅棘波及癫痫持续状态。2.慢性期注射Jaggedl后发作时间显著减少(n=5,p=0.00014),统计方法为重复ANOVA法继之Dunnet检验。注射DAPT+Jaggedl后,发作时间无明显减少(n=2)。3.急性期注射Jagged1后,发作时间(p=0.0048)、发作次数(p=0.019)较对照组显著增加(n=6或10)；注射DAPT后,发作时间(p=0.009)和发作次数(p=0.0111)较对照组显著减少(n=7)。统计方法为Mann-Whitney检验。4.200ng海人酸模型小鼠海马中,与对照组相比5w时主要分布在齿状回中,且表达量明显上调。结论1.成功构建了HS-MTLE的海马内电极-加药模型。2. Notchl信号通路在急性期模型中促进癫痫放电和发作,而在慢性期模型中抑制自发性癫痫发作。证明Notchl分子在HS-MTLE的形成和进展中存在不同作用。3. Notchl分子在慢性期海马组织中主要分布于DG区,且表达明显上调。