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试卤灵是一种氧杂蒽类的荧光染料,其分子中的7-位酚羟基较为活泼,取代之后会导致荧光淬灭、且颜色变浅;但当取代基与目标物质反应而脱去后,则又会重新释放出试卤灵,从而使其颜色和荧光得以恢复。利用试卤灵的这种特殊光学响应,并结合特异性的识别单元,人们已发展了多种打开型的荧光探针。此外,试卤灵还具有水溶性好、量子产率高、激发光谱宽、生物兼容性强等优点。基于此并结合实验室的研究方向,我们设计合成了若干以试卤灵为荧光团的光学探针,对探针性质进行了研究,并将其应用于不同生物样品分析中。主要工作包括以下两个方面: 1.以试卤灵为荧光母体,以对苯醌结构作为特异性反应基团,设计合成了一种新型心肌黄酶荧光探针。进一步,利用该探针、心肌黄酶、葡萄糖脱氢酶及氧化型辅酶(NAD+),构建了酶偶联反应体系,实现了对葡萄糖的检测。该体系对葡萄糖表现出了快速、灵敏的显色和荧光响应,检测限可达0.2μM,可用于正常人尿样中葡萄糖的检测。 2.以试卤灵为荧光母体,将其与7-硝基苯并呋咱(NBD)通过醚键相连接,设计合成了一种简单、稳定的打开型荧光探针,可用于半胱氨酸和谷胱甘肽的区分检测。检测原理是,半胱氨酸可与探针中的NBD发生芳香亲核取代重排反应,导致反应产物中氨基与NBD相连接;而谷胱甘肽由于缺乏邻近的氨基则不能发生该重排反应,导致反应产物中巯基(强淬灭基团)与NBD相连接。这些不同的反应产物具有不同的光学响应,从而可实现半胱氨酸和谷胱甘肽的区分检测。此外,该探针可在单一激发波长下对半胱氨酸和谷胱甘肽进行同时测定,并已用于人血浆样品分析。