【摘 要】
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【目的】通过比较阴道加德纳氏菌（Gardnerella vaginalis,GV）感染引起的小鼠细菌性阴道病（Bacterial vaginosis,BV）模型与常见菌群感染所致的BV模型的多项指标,寻找适合临床实验的小鼠BV模型。【方法】1、临床实验:收集2019年10月至2020年2月在大理大学第一附属医院妇科门诊就诊的10名BV患者作为临床组,取阴道分泌物行唾液酸酶快速检测、氨实验、p H值
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【目的】通过比较阴道加德纳氏菌（Gardnerella vaginalis,GV）感染引起的小鼠细菌性阴道病（Bacterial vaginosis,BV）模型与常见菌群感染所致的BV模型的多项指标,寻找适合临床实验的小鼠BV模型。【方法】1、临床实验:收集2019年10月至2020年2月在大理大学第一附属医院妇科门诊就诊的10名BV患者作为临床组,取阴道分泌物行唾液酸酶快速检测、氨实验、p H值测定。2、动物实验:将同一批次、同等环境下生存的60只成熟雌性KM种小鼠,随机分为对照组（A组,未做任何处理）及实验组。实验组阴道无菌PBS液预处理后,又分为B组（无菌PBS液处理）、C组（金黄色葡萄球菌+大肠埃希菌混合灌洗）的、D组（金黄色葡萄球菌+大肠埃希菌+无乳链球菌混合灌洗）、E组（金黄色葡萄球菌+大肠埃希菌+乙型溶血性链球菌混合灌洗）,F组（阴道加德纳氏菌灌洗）,每组10只,灌洗1次/日,共6天。造模成功后眼球采血、脱臼法处死小鼠并取材。3、数据采集:（1）肉眼观察小鼠阴道外观及生殖系统解剖;（2）镜下观察小鼠及临床组阴道分泌物涂片;（3）比较临床组及各组小鼠唾液酸酶快速检测、氨实验、p H值结果;（4）ELISA检测小鼠血清中IL-6和IL-10水平;（5）显微镜观察小鼠宫颈阴道组织HE染色及病理组织学评分。【结果】1、阴道外观及生殖系统炎症:F组小鼠阴道外观及生殖系统可见局部组织水肿,阴道内含黏液状或血性分泌物。炎症程度较C组E组普遍较轻。2、阴道分泌物涂片:C组F组小鼠阴道分泌物涂片检查,随着实验时间延长,镜下可见相应细菌和坏死细胞,上皮细胞排列紊乱、细胞膜边缘模糊不清、上皮细胞脱落增加、炎性细胞及红细胞增多等。临床组阴道分泌物涂片镜下可见:各类细菌、坏死细胞、线索细胞、炎性细胞及红细胞,同时见排列紊乱的上皮细胞及脱落的上皮细胞。3、唾液酸酶快速检测、p H值、氨实验:（1）与F组相比,A组、B组过氧化氢、唾液酸苷酶阳性率、白细胞酯阳性率、BV患病率,均有统计学差异;F组上述指标与临床组相比均无统计学差异;（2）与F组相比,A组、B组p H测量值均有统计学差异;F组与临床组相比无统计学差异;C组F组随实验时间延长,菌液灌注次数的增加及炎症的加重,p H值不同程度升高;（3）与F组相比,A组、B组氨实验阳性率均有统计学差异;F组与临床组相比无统计学差异;4、细胞因子:（1）与F组相比,D组、E组IL-6水平均有统计学差异;F组IL-10水平与E组相比有统计学差异;A组C组IL-6、IL-10水平与F组相比,均无统计学差异;（2）各组小鼠血清中检测的IL-6、IL-10两者之间,存在显著线性相关;（3）IL-6的特异性为85%,敏感度为100%,最佳临界值23.596 pg/m L;IL-10的敏感性及特异性均为100%,最佳临界值29.558 pg/m L;IL-6与IL-10联合检测的BV诊断效能高于单独检测IL-6的BV诊断效能,与单独检测IL-10的BV诊断效能相同。5、HE染色:F组HE染色可见组织水肿,炎性细胞浸润较不明显,淋巴细胞浸润明显,F组病变程度较C组E组病变程度轻。【结论】1、从阴道外观及解剖和病理指标、生化指标、免疫指标等方面验证了GV组符合BV动物模型的制备标准。2、GV构建的小鼠BV模型炎症程度较低,生化指标接近临床,符合BV的无黏膜炎症特点及免疫抑制状态表现。3、GV可构建小鼠BV模型应用于BV并发症、临床诊断及治疗方向等研究。
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