番茄渐渗系IL11-3分子标记的精细定位及其抗病相关基因的克隆

来源 :青岛农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:vicky1924
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
番茄的野生种含有很多抗病性相关的基因,在番茄的育种中广泛应用。其中,Lycopersicon.pennellii是一种生长在炎热干旱环境下的绿果番茄,对多种病虫害表现抗性。1994年,Y.Eshed和D.Zamir以野生番茄L.pennellii为供体亲本,栽培番茄Lycopersiconesculentum.cv.M82为受体亲本,利用了1030多个RFLP分子标记,建立了完整的野生番茄L.pennellii的渐渗系。   本研究利用L.pennellii(LA716)渐渗系中与番茄笫Ⅺ号染色体相关的四个株系IL11-1,2,3,4,分别和栽培番茄M82杂交获得其F2代分离群体,采用分子标记和基因共线性关系的方法,筛选出四个F2代群体中的共482株重组单株,利用拟南芥已知的COSⅡ标记定位番茄第Ⅺ号染色体上的IL11-3区段分子标记,获得了番茄第Ⅺ号染色体IL11-3区段精细标记的遗传图谱,并且在41个标记中找到并克隆了三个与番茄抗病性相关的基因。结果如下:   1、以野生番茄L.pennellii的渐渗系IL11-3株系为母本、M82为父本建立的F2代中,随机挑选出480个单株,利用定位各渐渗系染色体片段两端的分子标记COSIIMarkerC2_At2g14260、Hba78A16T7,筛选出发生交换的重组单株80个,计算出遗传距离。并且用已知的番茄IL11-3上的18个CAPS分子标记,在80个F2代重组单株中,进行PCR及酶切验证,建立了野生番茄L.pennellii的渐渗系IL11-3的分子标记的精细遗传图谱。这18个CAPS分子标记分别是C2_At4g10050、C2_At5g04590、TG400、C2_At3g44880、C2_At4g01560、C2_At3g44890、C2_At2g27730、C2_At3g52730、C2_At2g27290、C2_Atlg30825、C2_AGg54470、C2_At5g20890、cLEC-24-C3、C2_At5g60600、C2_At4g32930、T0302、BAC_119J05、C2_At5g25760。加上两端标记的这20个标记被定位在11.1cM之内,由此建立了渐渗系IL11-3区段精细标记的遗传图谱,该遗传图谱与康奈尔大学茄科作物网站www.sgn.cornell.edu公布的遗传距离不同。   2、分析番茄第Ⅺ号染色体上的41个CAPS标记,经过同源序列在GeneBank和EST库的比对,找到了7个与抗病相关的序列,克隆了三个与番茄抗病性相关的基因。   1)标记COSIIMarkerC2_At2g27450有与已知的公布序列AC217004、野生草莓(Fragariavesca)中一个抗盐抗热的cDNA序列(EX682439)以及番茄p-丙氨酸合成酶基因(Y19104)相同的QDXGL-GANXV氨基酸保守序列;克隆的这段基因序列长度为568bp,该序列与公布序列AC217004有98%的同源性,与野生草莓(Fvesca)中一个抗盐抗热的cDNA序列(EX682439)以及番茄β-丙氨酸合成酶基因(Y19104)有46%的同源性。标记COSIIMarkerC2_At2g27450的克隆序列及其AC217004均含有198bp的插入片段。   2)标记COSⅡMarkerC2_At3g44880的扩增序列与番茄Solanum.lycopersicum叶片坏死斑点相关的一个基因(AF321984)共有序列之间有99%的同源性。该扩增片断的基因全长为1800bp,其中352bp为扩增序列,但是,包含有94bp与AF321984不同的插入序列。   3)标记COSⅡMarkerC2_At2g27290的扩增序列是一个番茄S.lycopersicum的抗病基因Pto的激发子PtoR(AW039031)的相似序列,两者之间的共有序列有96%的同源性;但是渐渗系扩增片断长度为1113bp,其中的836bp是与AW039031不同的插入序列。
其他文献
摘 要:土地作为人们赖以生存的重要资源,如何重复利用,提高其利用效率具有重大意义。本文阐述了建设用地复垦概念,分析了农村建设用地复垦存在问题,最后提出了农村建设用地复垦解决对策。  关键词:建设用地;存在问题;解决对策  近年来随着城市化、工业化进程步伐加快,建设用地愈加紧缺。我们既要严格执行耕地保护政策,又要又要另辟蹊径,采取有效措施,突破土地瓶颈制约,保持经济社会持续、快速、健康发展。在当前“
我国的食用油料中木本油料所占比重不大,很在开发潜力。1.适宜在山地和丘陵地区生长,不与粮棉争地。2.种植一镒,收获多年。如种植油茶,一般5年后开支结果,8~10年进入盛果期,
摘 要:我国是一个多地震国家,处于地震带上,地壳比较活跃,这与建筑工程的质量安全关系密切。建筑抗震工作一直是建筑设计和施工的重点,本文对建筑抗震设计的思路进行分析,指出在建筑结构抗震设计中存在的问题,并提出防范措施,可供参考。  关键词:建筑工程;结构设计;抗震  1 目前我国建筑工程的现状及抗震设计原则  1976年唐山大地震,2008年中国又一次大地震——汶川地震,这对正在高速发展的中国和中国
摘 要:乡镇建设规划是实现建设特色的现代化农村的必然趋势,势在必行。在乡镇实际建设中,应积极改善乡镇规划的科学性,有效改善乡镇生活环境、新城镇的建设特点,促进城市和农村经济的可持续发展。本文分析了乡镇规划设计和建设管理应该坚持的原则,探究了具体的乡镇规划设计与建设管理对策,以期完善乡镇设计和建设规划管理。  关键词:乡镇;规划设计;建设管理  前言  近年来,促进乡镇规划和建设管理在城市和农村发展
摘 要:工程造价预算是建筑工程中十分重要的一个步骤,目前建筑工程造价预算控制问题仍有待加强,因此本文讨论了建筑工程造价预算的控制要点。  关键词: 建筑工程、造价预算、控制要点  前言:  工程造价预算控制对建筑工程的影响是重大的,建筑工程的造价超预算是建筑工程中常见的现象,基于此,建筑企业必须掌握造价预算的控制要点。  1、建筑工程造价预算的概述  对于建筑工程造价来说,指的是项目工程建设所需的
摘 要:市场经济的日渐完善,加快了建筑业规范化、法制化的进程,工程项目也逐步按照国际惯例进行管理。在选择合理低价中标的经营策略下,承包商要提高工程的经济效益,就必须增强经济补偿意识,重视索赔。本文对建筑经济管理中发生索赔的原因、建筑经济管理中工程索赔的流程以及建筑经济管理中工程索赔的索赔要点进行了论述分析,旨在提高建筑企业的经济效益。  关键词:建筑经济管理;索赔;原因;流程;要点  一、建筑经济
摘 要:随着大学生就业人数的逐年增加,就业压力越来越大,大学毕业生的就业渠道单一,造成这一现象的关键在于当前的教育体制,教学与实际脱节,不注重学生实践能力的培养,因此,高校应以理论培养为基础,注重实践教学环节,运用理论与实践相结合的新型教学模式,培养应用型人才,使其具有一定社会实践能力,适合企事业单位的需求。为了适应这种新的教育形势.应用型本科应运而生。  关键词: 应用型人才;音乐教育;实践教学
摘 要:近些年随着城市化进程的加快,市政道路工程项目越来越多。市政工程项目对我国城市发展有着重要的作用。而市政道路软基出路真空预压工艺对于市政道路工程的质量控制有着重要的作用,是市政道路工程施工过程中的关键工艺,在市政工程中有广泛的应用。本文将深入讨论如何应用市政道路软基处理真空工艺,提高施工效率和工程的施工质量。  关键词:市政道路; 软土路基; 真空预压技术; 施工工艺; 质量控制;  我国社
摘 要:本文对黑龙江省的国标舞进行了详细的分析和调查,把得到的调查结果进行了分析和研究,从中找到阻碍黑龙江省国标舞发展的原因,根据原因,提出促进黑龙江省国标舞发展的方法,为黑龙江省的拉丁发展做出一份贡献。  关键词:黑龙江省;国标舞;发展  一、前言  国标舞经过多年的发展,在我国已经普及而来,目前的国标舞的水平也得到了一定的提高,各种舞蹈比赛也越来越多。国标舞的发展不但为我国人的民日常的生活提供
版式革新花开有期──无锡日报版面的改革项友炜,葛明没有锦绣的版面语言,一切出色新闻报道便只是断线珍珠,可谓“纵豆蔻词工难赋深情”。如何更好地运用版面语言为报纸宣传服务