腹膜纤维化大鼠腹膜组织脾酪氨酸激酶表达情况的研究

来源 :湖南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ziyufenyang
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目的:腹膜纤维化是腹膜透析患者的长期并发症之一,可导致腹膜透析失败。最近的研究表明脾酪氨酸激酶与各种纤维化疾病的发生有关,如肾纤维化、肝纤维化等。但是,尚无关于脾酪氨酸激酶对腹膜纤维化作用的信息。在本研究中,通过观察腹膜纤维化大鼠模型腹膜组织脾酪氨酸激酶表达情况,探索脾酪氨酸激酶在腹膜纤维化中的作用,寻找腹膜纤维化新的治疗靶点。方法:选用健康成年SD雄性大鼠12只,随机分成2组,分别为正常组6只,不做特殊处理;氯己定组6只,连续3周腹腔给药10ml/kg的0.1%氯已定建立腹膜纤维化模型。造模结束后对大鼠同时进行安乐死,留取腹膜组织及血液标本。将腹膜组织进行HE染色和Masson染色观察腹膜组织病理学改变,以及进行免疫组化、定量逆转录聚合酶链反应(q RT-PCR)检测SyK的表达。采用酶联免疫吸附(ELISA)测定血液中白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的水平,同模型组SyK mRNA的表达进行相关性比较。结果:1.腹腔给药氯己定成功建立腹膜纤维化模型;2.免疫组化和qRT-PCR结果显示,与正常组对比,模型组的腹膜组织高表达脾酪氨酸激酶(免疫组化:2.80±0.42 VS 5.50±0.97,P<0.05;qRT-PCR:1.21±0.73 VS 4.97±2.05,P<0.01);3.ELISA测定血清炎性细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6和MCP-1结果提示,与正常组对比,模型组4种炎性细胞因子水平均升高(1.71±0.53ng/mL VS 6.76±2.72ng/mL,P<0.01;1.23±0.60ng/mL VS4.21±2.13ng/mL,P<0.01;1.15±0.71ng/mL VS 10.69±3.15ng/mL,P<0.01;1.59±0.67ng/mL VS 6.98±3.65ng/mL,P<0.01);4.模型组SyK mRNA的水平和血炎性细胞因子进行Pearson相关性分析结果显示脾酪氨酸激酶的表达与IL-1β、INF-α、IL-6、MCP-1炎性细胞因子的水平呈正相关(R2=0.7462,P=0.0265;R2=0.7796,P=0.0198;R2=0.7807,P=0.0195;R2=0.7635,P=0.0229)。结论:氯己定诱导的腹膜纤维化大鼠模型腹膜组织中SyK表达升高,与炎性细胞因子水平呈正相关。脾酪氨酸激酶可能参与腹膜纤维化的过程,可为临床上腹膜纤维化的防治提供新的治疗靶点。
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