【摘 要】
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目的:研究长链非编码RNA CASC2在食管鳞状细胞癌及其对应癌旁组织的表达差异,并初步探究lncRNACASC2在食管鳞状细胞癌中的作用。方法:首先,我们利用PCR检测了 lncRNACASC2在
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目的:研究长链非编码RNA CASC2在食管鳞状细胞癌及其对应癌旁组织的表达差异,并初步探究lncRNACASC2在食管鳞状细胞癌中的作用。方法:首先,我们利用PCR检测了 lncRNACASC2在食管鳞癌组织和癌旁组织中的表达水平;同时利用qPCR技术检测了多种食管鳞癌细胞株及正常上皮细胞中lncRNACASC2的表达结果。其次,基于以上研究,为了探究lncRNACASC2在食管癌中所发挥的生物学功能,我们在食管鳞癌细胞EC109中分别转染CASC2 siRNA后进行培养,并收集EC109细胞,通过qPCR实验检测细胞中lncRNA CASC2的表达以及转染效率,观察lncRNACASC2在细胞水平对食管癌细胞增殖的影响。此外,为进一步探明lncRNA CASC2对食管癌细胞生长增殖的影响,我们构建CASC2 siRNA慢病毒和CASC2过表达慢病毒及其相对应的对照慢病毒,构建慢病毒后先转染至食管鳞癌细胞,通过对细胞荧光拍照观察慢病毒侵染效果,进一步验证lncRNACASC2在细胞水平对食管鳞癌细胞增殖的影响。最后,在动物水平上构建食管癌裸鼠皮下瘤模型,利用HE染色,Tunnel染色,免疫组化等实验进一步检测CACS2对食管鳞癌的作用。结果:本课题实验结果表明与食管鳞癌患者癌旁组织相比,lncRNACASC2癌组织中的表达下降;同时通过对多种食管鳞癌细胞株及正常上皮细胞株中lncRNA CASC2的检测,证实其在食管鳞癌细胞中的表达也低于正常食管上皮细胞;而在食管鳞癌细胞中CASC2表达增加能够降低细胞的增殖,其表达降低后则促进癌细胞增殖,表明lncRNA CASC2在食管鳞癌中作为抑癌基因发挥作用,一定程度抑制了食管鳞癌细胞的增殖;此外,为了探究CASC2在动物提体内对食管鳞癌的影响,我们构建了食管鳞癌皮下瘤小鼠,并发现体内实验结果与细胞结果一致,即CASC2表达增加可减缓细胞的增殖抑制肿瘤的形成,CASC2表达降低后可加快细胞增殖促进肿瘤的形成;CASC2表达变化对食管癌肿瘤组织中细胞凋亡的影响。结论:lncRNA CASC2在食管鳞状细胞癌组织和细胞中表达均下调初步证实了CASC2在食管鳞癌中作为抑癌基因而发挥作用,其表达升高可以抑制食管鳞癌肿瘤细胞的增殖,进而抑制食管肿瘤的形成。
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