榛蘑多糖提取理化特征及抗氧化活性研究

来源 :长春师范大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:fleur0512
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本论文以榛蘑为实验原料,对其多糖的提取、分离纯化、理化和结构特征,以及抗氧化活性进行系统的比较研究。采用超声破碎提取(UDE)、响应面法优化出榛蘑多糖最佳提取条件:在超声功率915 W,提取温度69.27℃,时间39.13 min,该条件下多糖得率达到19.5%,在修订的最优实验条件下(功率915 W、温度69℃、时间39min),多糖的实验得率为19.89±0.86%,与预测得率(19.5%)接近,说明建立的模型准确。榛蘑粗多糖经过Sevag法除蛋白、透析法除去单糖、无机盐以及小分子杂质,再通过EDAE-Sepharose Fast Fl-ow柱层析分离和Sephadex G-100凝胶过滤纯化,分别获得两个均一多糖AMPs-1-1和AMPs-2-1。利用苯酚-浓硫酸法测定AMPs-1-1和AMPs-2-1总糖含量分别为91.2%和88.5%;Bradford法测定AMPs-1和AMPs-2蛋白质含量分别为:2.17%和4.03%;间羟基联苯法测定AMPs-1和AMPs-2糖醛酸含量分别为:1.28%和3.36%;两个多糖组分的理化性质和结构特征,通过高效凝胶渗透色谱(HPGPC)、高效液相色谱(HPLC)、气相色谱-质谱仪(GC-MS)、傅立叶变换红外光谱(FT-IR)和核磁共振波谱(NMR)进行了表征和比较。AMPs-1-1是一个酸性杂多糖,平均分子量为6.76×10~4 Da,由葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)和葡萄糖醛酸(GlcA)组成,其摩尔百分含量分别为89.06%、9.59%和1.34%,其主链结构为(1?)-β-D-Glcp,(1?3,6)-?-D-Glcp和(1?3)-β-D-Glcp。AMPs-2-1也是一个酸性杂多糖,平均分子量为1.23×10~5 Da,由Glc、Gal、GlcA和甘露糖(Man)组成,其摩尔百分含量分别为65.28%、22.87%、2.87%和8.98%,其主链结构为(1?3,6)-?-D-Glcp和(1?6)-β-D-Glcp。FT-IR显示多糖AMPs-1-1和AMPs-2-1均具有多糖的特征吸收峰,都含有醛酸和蛋白质,具有a-和β-构型及吡喃糖环。采用总抗氧化能力(FRAP)、1,1-二苯-2-苦基肼自由基(DPPH·)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)自由基(ABTS~+·)和氧自由基吸收能力(ORAC)实验测定多糖AMPs-1-1和AMPs-2-1的抗氧化活性,数据表明获取的2个多糖组分的抗氧化活性非常明显,其抗氧化活性与多糖的浓度成正相关关系。且研究发现AMPs-2-1较AMPs-1-1具有更强的DPPH?和ABTS~+?清除活性、较高的FRAP和ORAC值,因此具有较高的抗氧化活性。且研究发现AMPs-2-1的抗氧化活性明显高于AMPs-1-1,说明相对低的分子量、较高的糖醛酸含量的多糖其抗氧化活性相对较高。这些结果表明,UDE是一种有效的提取技术,AMPs-2-1可作为潜在的天然抗氧化剂。
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