研究目的反复种植失败（RIF）一般是指患有不孕症的女性,经过多个体外受精或卵细胞浆内单精子显微注射（IVF/ICSI）周期治疗,累计移植多枚优质胚胎仍未能成功获得临床妊娠。RIF是影响体外受精-胚胎移植（IVF-ET）后临床妊娠率提高的重要限制因素。RIF的发病机制十分复杂且目前尚未明确,其中子宫内膜免疫因素与胚胎着床的关系近年来备受关注。大量研究表明,子宫内膜中的免疫细胞和细胞因子对胚胎黏附、滋养细胞侵入、血管重构和免疫耐受的影响,是决定胚胎植入和发育的重要因素。现研究认为,外周血中的T淋巴细胞亚群Th1/Th2细胞平衡及其分泌的多种细胞因子参与母体妊娠免疫耐受的形成,而关于子宫内膜中,尤其是种植窗口期的细胞因子的表达,及其与RIF发生机制之间的关系研究较少。本研究通过对比RIF患者和首次移植即成功妊娠患者非移植周期黄体中期子宫内膜和外周血中的多种免疫因子水平,主要包括白介素6（IL-6）、IL-10、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、NF-κB,研究子宫内膜与外周血中的细胞因子水平是否具有一致性,并分析其与临床指标的相关性,以期从子宫内膜免疫方面提示RIF的发生机制。研究方法在2020年12月至2021年11月,于山东大学齐鲁医院生殖医学中心进行此项研究,共招募16名既往至少接受过3次胚胎移植、累计移植至少4枚优质胚胎而未能获得临床妊娠的RIF患者,7名接受IVF/ICSI助孕首次胚胎移植即获临床妊娠的对照组患者。两组患者均在非胚胎移植周期进行排卵监测,排卵后第7天进行子宫内膜取样并抽取外周血。对外周血标本进行流式高通量多因子检测,子宫内膜组织标本分为两部分,一部分进行免疫组化,半定量检测其IL-6、IL-10、TNF-α、NF-κB的表达,另一部分进行实时荧光定量 PCR,检测其 IL-6、IL-10、NF-κB 的表达。使用 IBM SPSS Statistics 25.0软件进行统计学分析。研究结果1.免疫组化显示,RIF组排卵后第7天子宫内膜IL-6、IL-10、TNF-α、NF-κB表达均低于对照组（P＜0.05）。2.RT-qPCR显示,RIF组排卵后第7天子宫内膜IL-6表达低于对照组,但差异没有统计学意义（P＞0.05）,IL-10表达显著低于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）,两组患者子宫内膜中NF-κB水平没有明显差异。3.与对照组相比,RIF组外周血中IL-6水平显著升高,IL-10水平显著下降,差异均具有统计学意义（P＜0.05）,两组的TNF-α水平没有显著差异。4.相关性分析结果显示,RIF组患者外周血IL-6与年龄呈正相关（r=0.507,P=0.045）,IL-10与AMH呈负相关（r=-0.571,P=0.021）,与TSH呈负相关（r=-0.802,P=0.000）其他免疫因子与各临床指标均无明显相关性。5.RIF组患者子宫内膜IL-6与基础FSH呈负相关（r=-0.539,P=0.031）,IL-10与BMI 呈正相关（r=0.597,P=0.015）,TNF-α 与基础 FSH 呈负相关（r=-0.528,P=0.035）,其他免疫因子与各临床指标均无明显相关性;对照组患者子宫内膜IL-10与不孕年限呈正相关（r=0.762,P=0.047）,而其他免疫因子与各临床指标均无明显相关性。6.RIF组子宫内膜中IL-6、IL-10、TNF-α表达水平与外周血中IL-6、IL-10、TNF-α水平没有显著的相关性（P＞0.05）。结论1.本研究通过小样本研究发现,植入窗口期子宫内膜中IL-6、IL-10、TNF-α、NF-κB表达水平低可能作为胚胎植入的不利因素之一。2.本研究通过小样本研究发现,植入窗口期外周血中IL-6水平升高、IL-10水平降低可能作为胚胎植入的不利因素之一。3.胚胎反复种植失败患者植入窗口期子宫内膜中IL-6、IL-10、TNF-α表达水平与外周血中对应细胞因子表达水平没有明显相关性。