论文部分内容阅读
目的:观察糖尿病患者外周血内皮祖细胞(Endothelialprogenitorcells,EPCs)归巢能力的变化。
方法:密度梯度离心分离糖尿病患者与健康人群外周血EPCs,培养7天后激光共聚焦显微镜鉴定,并用荧光染料PKH26对其染色;构建裸鼠颈动脉损伤模型;实验分组:健康组、糖尿病患者组(diabetesmellitus,DM)、磷酸盐缓冲液对照组(Phosphatebufferedsaline,PBS)。健康组给予裸鼠移植健康人EPCs,DM组给予裸鼠移植糖尿病患者EPCs,PBS对照组给予裸鼠移植PBS。将预先经荧光染料PKH26染色的EPCs经尾静脉移植入颈动脉损伤造模后的裸鼠体内,激光共聚焦显微镜观察移植的EPCs在颈动脉受损部位的归巢能力。
结果:三组均未看到裸鼠颈动脉损伤处有红色荧光聚集,说明移植的EPCs未归巢至颈动脉内皮损伤部位。
结论:本实验理论上应该观察到EPCs可以“归巢”到血管的损伤部位,对其进行修复,且糖尿病患者的外周血EPCs归巢能力应明显低于健康人,糖尿病患者与健康人EPCs的归巢能力存在差异,但本实验未直接观察到EPCs的归巢,其失败原因及操作步骤的改进方法和注意事项详见正文中阐述。