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昆虫不像高等动物那样有完善专一的免疫体系,缺乏B和T淋巴细胞,没有免疫球蛋白和补体,但是它们有极强的适应能力和防御能力。昆虫在感染病菌或体壁受到损伤等情况下能够迅速合成一系列低分子量的抗菌蛋白/多肽,杀死病菌并且阻止病菌的继续侵染。昆虫抗菌肽具有分子量小、热稳定性好、不易被水解、无免疫原性等特点。近年来,昆虫抗菌肽的研究逐渐成为昆虫免疫学及分子生物学研究热点之一,迄今已从各类昆虫分离鉴定200多个抗菌肽分子。
本文首次以外生翅类不完全变态的直翅目昆虫中华稻蝗(Oxya chinensis)为材料,成虫通过带菌针刺、室内饲养等方法诱导,蝗卵采用菌液浸泡、紫外照射等方法诱导,随后采用浸提、凝胶过滤层析、反相高效液相色谱分析和Tricine-SDS-PAGE等手段分离、分析中华稻蝗中的抗菌物质。成虫和蝗卵样品经诱导后均有抗菌物质产生。通过两次Sephadex G-50凝胶过滤层析,对其成分进行分离。成虫样品RP-HPLC色谱图上在2.09 min、5.38 min、13.57 min出现3个峰;Tricine-SDS-PAGE电泳图上在97 kDa、37 kDa处有2条带。
同时,对所提取抗菌物质的部分理化性质进行了测定。成虫及蝗卵抗菌物质的抗细菌谱结果表明其仅对实验所用革兰阳性菌具有广泛的抑制作用;成虫及蝗卵抗菌物质热稳定性较好,40℃-60℃处理30 min其抑菌活性均无明显变化;具有较好的酸碱稳定性,在pH值(pH4-10)条件下具有抗菌活性:成虫及蝗卵抗菌物质的紫外吸收光谱表明其均在214 nm附近有吸收,成虫抗菌物质还在280 nm附近有吸收,蝗卵抗菌物质在260 nm附近也有吸收。
本文对中华稻蝗抗菌物质初步分离提取及其部分性质的探索,为此类抗菌物质的进一步研究奠定了一定的基础。