论文部分内容阅读
为建立嗜热链球菌超浓缩培养技术,本研究首先在基础培养基的基础上进行了主要营养物质和增殖因子的筛选,确定了超浓缩培养基成分组成,并采用离心半连续法进行超浓缩培养,同时研究了嗜热链球菌对培养基中糖、蛋白质和脂肪三大营养物质代谢规律,并采用电子显微镜、TUNEL染色和琼脂糖凝胶电泳对S.t在超浓缩培养过程中不同时间超微结构变化与细胞凋亡进行了研究,为嗜热链球菌超浓缩培养技术提供依据。 本研究确定了嗜热链球菌的增殖培养基及培养条件,增殖培养基为1.5%乳糖、0.25%葡萄糖、1.5%大豆蛋白胨、1.0%的水解乳蛋白、1.5%酵母浸粉、3.5%盐溶液、0.15%维生素C、0.1%赖氨酸、0.05%谷氨酸、0.05%精氨酸、5%麦芽汁、5%西红柿汁;增殖方式确定为半连续法培养,利用离心二次培养,菌数最高达到1.032×1010cfu/mL,比在基础培养基中培养高10倍,证明此方法对嗜热链球菌来说是非常有效的超浓缩培养方法。 结果表明,嗜热链球菌在营养丰富的培养基中的生长延滞期缩短,到达对数生长顶点的时间变短,稳定期的时间延长,当经过二次培养后,嗜热链球菌几乎不经过延滞期直接到达对数期,平稳期持续的时间较短,很快到达衰亡期;嗜热链球菌在超浓缩培养过程中三大营养物质的代谢规律也同它的培养过程有很大的关系,菌数多,其代谢旺盛,菌数降低其代谢速度减慢;嗜热链球菌在超浓缩培养过程中存在着明显的菌体形态变化,并可能存在着细胞凋亡,与菌体增殖和产酸规律密切相关,随着培养时间延长,培养基中营养物质变得贫乏,菌体形态变化和细胞凋亡的情况愈加明显。