TGF-β1/Smad信号通路调控哈萨克族食管鳞癌上皮间质转化的研究

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目的:探讨TGF-β1/Smad信号通路在食管鳞癌上皮-间质转化(EMT)的作用及其机制;在细胞学实验的基础上探讨TGF-β1/Smad信号通路蛋白和EMT相关蛋白在哈萨克族食管鳞癌中的表达,分析其与临床病理特征的关系,为深入研究TGF-β1/Smad信号通路调控哈萨克族食管癌EMT的发生发展作用机制奠定基础,为食管癌浸润转移的阻断治疗提供理论基础。方法:用不同浓度的重组TGF-β1刺激及TGFβ受体抑制剂SB431542抑制处理食管癌细胞Eca109,采用Western Blot方法检测TGF-β1/Smad通路和EMT相关蛋白表达水平;Transwell侵袭实验检测侵袭和迁移能力;进一步运用免疫组化检测100例食管鳞癌组织和58例癌旁非癌组织构成的组织芯片,研究TGF-β1/Smad信号和EMT相关蛋白的表达,分析TGF-β1/Smad和EMT相关蛋白与临床病理参数的关系。结果: TGF-β1处理Eca109细胞,可以诱导细胞发生EMT形态改变,并且增强细胞侵袭能力,Western Blot检测发现N-cadherin、Vimentin、Smad2/3和Smad4蛋白表达显著上调,但Smad7蛋白表达下调;而SB431542处理细胞,结果显示:Vimentin、Smad2/3和Smad4蛋白表达水平下调,Smad7蛋白表达水平上调;免疫组化检测哈萨克族食管鳞癌组织中TGF-β1、p-Smad2/3、N-cadherin和Vimentin蛋白表达明显高于癌旁组织中的表达(p<0.001),E-cadherin蛋白在食管鳞癌组织中的表达低于癌旁组织中的表达(p<0.001);TGF-β1的表达与p-Smad2/3的表达呈正相关(r=0.186,p=0.064),与E-cadherin的表达呈负相关关系(r=-0.221, p=0.027),与N-cadherin表达呈正相关关系(r=0.321, p=0.001),与Vimentin表达呈正相关,但差异无统计学意义(r=0.113, p=0.265)结论:1. TGF-β1/Smad信号转导通路介导食管鳞状细胞癌细胞系Eca109发生EMT;2. TGF-β1、p-Smad2/3蛋白在食管鳞癌中高表达,且TGF-β1与E-cadherin表达呈负相关,与N-cadherin表达呈正相关,提示TGF-β1/Smad信号通路调控的EMT改变与食管鳞癌发生发展密切相关。
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