【摘 要】
：
背景:硫酸软骨素蛋白多糖（CSPGs）在心脏病理性重塑和缺血再灌注（I/R）损伤后的纤维化区域高表达。CSPGs与心肌纤维化相关,C4S是主要的硫酸化亚型。但是心肌梗死（MI）后成纤维细胞诱导CSPGs表达的机制还没有完全阐明。目的:本研究的目的是通过体内体外实验阐述I/R损伤诱导成纤维细胞表达CSPGs的机制和干预措施。方法:（1）通过构建大鼠心脏I/R损伤模型,按照实验设计分为对照组和I/R模
论文部分内容阅读
背景:硫酸软骨素蛋白多糖（CSPGs）在心脏病理性重塑和缺血再灌注（I/R）损伤后的纤维化区域高表达。CSPGs与心肌纤维化相关,C4S是主要的硫酸化亚型。但是心肌梗死（MI）后成纤维细胞诱导CSPGs表达的机制还没有完全阐明。目的:本研究的目的是通过体内体外实验阐述I/R损伤诱导成纤维细胞表达CSPGs的机制和干预措施。方法:（1）通过构建大鼠心脏I/R损伤模型,按照实验设计分为对照组和I/R模型组,对心脏组织进行Masson三色染色,阿利新蓝染色来验证模型组心肌纤维化和CSPGs的表达情况,使用WB来验证模型组I型胶原蛋白的表达情况。（2）通过q PCR,细胞免疫荧光,WB检测α-平滑肌肌动蛋白（SMA）验证体外使用氧-葡萄糖剥夺（OGD）+转化生长因子（TGF）β1诱导成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞。使用q PCR,WB验证OGD+TGFβ1诱导组中CSPGs的表达情况。通过WB观察在OGD+TGFβ1诱导组中成纤维细胞Smad3信号通路和PI3K/Akt/m TOR信号通路的激活情况。通过使用针对PI3K/Akt/m TOR信号通路的小分子抑制剂ZSTK474、MK2206、AZD8055和使用si RNA分别敲低Smad3、Raptor、Rictor干预细胞,通过WB、细胞免疫荧光验证OGD+TGFβ1诱导成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞分泌C4S的关键靶点。（3）通过MTT实验验证成纤维细胞经受OGD,OGD+TGFβ1,OGD+TGFβ1+黄芪甲苷（AS-IV）干预后的细胞增殖情况。使用流式细胞术检测细胞周期,WB检测增殖细胞核抗原（PCNA）验证成纤维细胞干预后的增殖情况。使用划痕实验验证TGFβ1和AS-IV对成纤维细胞迁移能力的影响。使用WB,细胞免疫荧光检测α-SMA验证AS-IV干预后对成纤维细胞转分化的影响。使用胶原凝胶收缩实验验证OGD+TGFβ1,OGD+TGFβ1+AS-IV干预后对肌成纤维细胞收缩特性的影响。通过WB观察在AS-IV干预后成纤维细胞PI3K/Akt/m TOR信号通路的激活情况。用20mg/kg AS-IV灌胃处理构建的心脏I/R损伤大鼠模型,通过心脏组织Masson三色和阿利新蓝染色验证AS-IV对I/R损伤诱导的心肌纤维化和CSPGs表达的影响。通过WB检测验证AS-IV干预后对I/R损伤诱导的I型胶原蛋白表达的影响。结果:（1）心肌I/R损伤诱导心肌纤维化,在心肌I/R损伤后7天CSPGs高表达并与心肌纤维化区域共定位,在造模后14天,28天持续高表达,心肌I/R损伤诱导I型胶原蛋白表达增加。（2）在体外OGD+TGFβ1刺激诱导成纤维细胞高表达α-SMA和分泌C4S。成纤维细胞经OGD+TGFβ1处理,诱导Smad3、Akt、PRAS40、p70S6K磷酸化蛋白水平表达增加。使用PI3K、Akt、m TOR的小分子抑制剂（ZSTK474、MK2206、AZD8055）分别干预细胞,结果显示OGD+TGFβ1处理诱导肌成纤维细胞转化,并且C4S合成是m TOR依赖性的,而上游经典PI3K/Akt轴没有显著作用。使用靶向Smad3、Rptor或Rictor的si RNA敲低后,结果表明m TORC1对于促进OGD+TGFβ1诱导的肌成纤维细胞转化和C4S合成至关重要。这种反应可能是通过典型的Smad3和m TORC1信号之间的传导来介导的。（3）在体外用30μM AS-IV干预后抑制成纤维细胞的增殖,将成纤维细胞的细胞周期阻滞在G1期,并抑制其迁移,转分化为肌成纤维细胞和其收缩功能。AS-IV是通过抑制m TORC1的磷酸化来起作用,而不是PI3K/Akt。体内在I/R模型中进行20mg/kg AS-IV灌胃可以抑制I/R损伤后心肌纤维化和CSPGs的表达。结论:m TORC1对于OGD+TGFβ1诱导肌成纤维细胞转分化和C4S分泌至关重要,而上游经典PI3K/Akt轴则没有显著作用。这可能是通过Smad3和m TORC1信号之间的传导来介导的。AS-IV干预可以抑制OGD+TGFβ1诱导的成纤维细胞增殖,迁移,转分化和收缩。I/R损伤诱导心肌纤维化和CSPGs高表达,AS-IV灌胃抑制心肌纤维化和CSPGs的表达。
其他文献
GH4169高温合金的热加工和冷加工性能优良,常作为航空航天等领域的高温部件用材,由于工作环境对于材料的组织性能具有较高要求,因此有必要采用特殊的处理及生产手段对此类材料进行改良。多向锻造技术作为一种典型的剧烈塑性变形工艺,通过对锻件施加不同载荷方向的压缩变形来实现晶粒组织的显著细化,从而获得显著提高的综合力学性能。本文在闭式多向锻造（Closed multidirectional forging
随着能源和环境危机日趋严重,开发绿色能源和节能技术成为当前迫在眉睫的问题。LaFeO3作为ABO3型钙钛矿氧化物由于具有来源广、价格低廉、耐高温、环境友好等优点被视作具有巨大潜力的镍氢电池新型负极材料。但由于LaFeO3具有易团聚、电导率低、动力学性能差等问题限制了其进一步的应用。为解决这些问题,本文通过掺杂以及包覆处理的方法对LaFeO3进行改性,系统的研究了LaFeO3的微观结构和电化学性能,
取代1-氨基异喹啉和联芳基轴手性化合物广泛存在于许多天然产物和生物活性分子中,例如,Papaverine、Sanguinarine、Mastigophorene和Steganacin等都具有良好的生物活性。此外,1,1′-联-2-萘酚（BINOL）、2-氨基-2′-羟基-1,1′-联萘基（NOBIN）和1,1′-联-2-萘胺（BINAM）为代表的联芳基轴手性化合物已被广泛应用于不对称催化领域。因此
研究背景结核病是由结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,M.tuberculosis）感染引起的一种慢性传染病。在宿主抵御M tuberculosis感染中,T细胞介导的免疫应答发挥主要作用。卡介苗（Bacillus Calmette-Guérin,BCG）是唯一获得临床许可的结核病疫苗。新生儿接种BCG可预防对儿童罹患严重的结核病,但对成人缺乏有效的保护。其中的原因
自润滑关节轴承以其承载能力强、耐腐蚀、自润滑等优异特性,在航空航天等领域发挥着重要作用,开展对自润滑材料性能的研究是提高自润滑关节轴承质量和延长其使用寿命的关键。聚四氟乙烯（PTFE）自润滑性能优异,然而较差的力学性能和耐磨性制约了其在摩擦学领域的应用。对PTFE的填充改性是改善和克服PTFE的缺陷,以及增强聚合物摩擦学性能的有效方法。然而,一些填料（例如:二氧化硅、氧化铝和少层石墨烯）的掺杂虽能
手性是自然界广泛存在的现象之一,探究分子手性的构造与表达对于理解自然界中的各种复杂的生命过程具有重大的意义。圆偏振发光（CPL）作为手性发光材料的特征之一,主要是指手性发光物质在光或电的激发下,发出的左右圆偏振光强度不同的现象。近年来,研究人员对具有圆偏振发光性质的手性光学材料表现出极大的关注,这是由于圆偏振光在光学信息加密存储、生物编码和不对称光聚合等方面有巨大的应用价值。而构筑能对外界刺激作出
燃料电池作为电力能源的一种,特点是可以直接将燃料的化学能转换为电能。在燃料电池工作过程需要一定量的催化剂来降低反应对体系环境的要求并提高反应速率。因此,催化剂的研究探索在燃料电池的发展应用中具有非常重要的意义。目前在燃料电池催化剂领域中,Pt被公认为是效果最好的。但是传统的Pt催化剂存在催化效率偏低、循环寿命短、稳定性不理想等诸多问题,加之由于地球上的Pt元素含量极低且价格昂贵,使得现阶段燃料电池
MXene是近年来发展的一类新型过渡金属碳/氮化物二维纳米材料，其在有机涂料中的应用逐渐引起关注。在MXene的种类、制备方法和性能的简介基础上，总结了其在电磁屏蔽涂料、防腐涂料和多功能涂料制备中的研究进展。报道显示，采用MXene制备的电磁屏蔽薄膜或涂层性能突出，MXene也能显著改善纯环氧树脂或纯聚氨酯树脂涂层的防腐性能，并在多功能涂层中展现出了良好的发展前景，但MXene与涂料各组分的相互作
随着世界经济进入后工业化高速发展阶段,世界面临的资源紧张和环境污染问题越来越恶化,严重的影响着人们的生活以及社会的进步。为了改进过去传统的工业生产方式,世界可持续发展工商理事会（WBCSD）提出了生态效率（Eco-efficiency）的概念,其核心思想是以最少的资源耗费、最少的废弃物和污染产生,从而创造最多的社会财富。本文通过不同方法评价中国省际静态生态效率、动态生态效率、生态效率空间关联及影响
随着现代科学技术的不断发展与进步,视频监控以较低的成本在交通要道、车站、机场、公园、学校等重要公共场所得到广泛应用。准确地估计视频或图像中的目标对象数量是一项具有重要意义且充满挑战的任务。在各种目标计数任务中,人群计数具有广泛的实际应用,在安防预警、城市规划、智能商业、交通调度等众多领域均起着重要的作用。人群计数的主要任务是精确估计人群图像中的人数与人群密度的空间分布,然而由于人群场景存在遮挡、光