湖北省咸宁市刺猬中钩端螺旋体及SFTSV的分子流行病学研究

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研究背景:钩端螺旋体病是一种人兽共患传染病,主要是由钩端螺旋体感染引发。据世界卫生组织估计,全世界每年有100多万例钩端螺旋体严重病例,其中死亡有6万多例。在我国,钩端螺旋体病是一种常见的国家法定乙类传染病,29个省份均报告有该病发生。湖北省是钩端螺旋体病的主要流行地区之一,其中2000~2009年共报告发病数1793例,年平均发病率为0.19(1/10万),病死率为1.78%(23/1793)。发热伴血小板减少综合征(Severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS)是一种新发传染病,蜱虫叮咬是该病最主要的传播方式。该病最早在中国发现,目前在南韩、日本和越南也发现该病流行。该病是由发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)感染引发的,该病毒属于布尼亚病毒科白蛉病毒属。截至2014年底,全国23个省份共报告5000余例人传人感染病例。野生动物是人兽共患病的宿主,刺猬广泛分布于我国,由于传统中医学认为刺猬具有很高的中药价值,因此在湖北地区人们经常捕食刺猬,增高了感染人兽共患传染病的风险。本研究对湖北省咸宁地区采集的刺猬进行钩端螺旋体和SFTSV的分子流行病学调查,了解刺猬体内的钩体携带率及SFTSV的感染状况,评价刺猬在钩端螺旋体病和SFTS传播中的作用,为湖北省钩端螺旋体病和SFTS的监测以及防控提供依据。研究方法:1、2018年5月和10月,用雾网从湖北省咸宁市捕获刺猬,采集刺猬的血液、脾脏、肾脏存于-80℃。2、从刺猬肾脏组织中提取总DNA,针对刺猬DNA用PCR扩增钩端螺旋体rrs2、sec Y和fla B基因检测钩端螺旋体;从刺猬脾脏组织中提取RNA,针对刺猬RNA用RT-PCR扩增SFTSV的S、M、L三个片段,检测SFTSV的感染。3、针对PCR扩增呈阳性的产物,进行克隆和测序,采用软件MEGA7.0构建系统发育进化树,并进行系统进化分析。4、运用ELISA检测刺猬血清内SFTSV总抗体。研究结果:1、从湖北省咸宁市共采集41只刺猬,其中5月捕获22只,10月捕获19只。通过形态学观察,采集的刺猬均为远东刺猬。2、PCR扩增结果显示,刺猬中钩端螺旋体rrs2、sec Y和fla B基因的阳性率分别为19.5%(8/41)、12.2%(5/41)和9.8%(4/41)。系统发育分析表明,刺猬钩端螺旋体的rrs2、sec Y和fla B基因部分序列的同源性为99.0%-100%,本研究中检测到的钩端螺旋体都是与Leptospira interrogans型聚在同一个分支上。3、RT-PCR结果和ELISA结果显示,刺猬中SFTSV RNA和抗体均为阴性。研究结论:1、湖北省咸宁地区刺猬钩端螺旋体感染率较高,说明刺猬是我国钩端螺旋体的宿主动物之一。2、从湖北省咸宁市采集的刺猬体内检测SFTSV阴性,说明采样时间、地点和样本量可能需要调整。3、捕捉、屠宰和食用野生刺猬存在感染钩端螺旋体的风险,有必要对这类人群人加强防护,以降低感染风险。
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