洋虫内共生菌多样性及其秸秆降解菌的筛选

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洋虫(Martianus dermestoides),又名九龙虫、长寿虫,属鞘翅目拟步行虫科,是一种以仓储药材为食的资源性昆虫。文献表明内共生菌与昆虫建立了密切的互利共生关系,不同昆虫内共生菌群落结构和丰度有着较大差异,是极具研究价值的生物资源。微生物是以秸秆饲料化、肥料化等农业为主的秸秆综合利用的核心,所以筛选、分析具有特定功能的微生物在秸秆资源综合利用中具有重要意义。本研究利用高通量测序技术对细菌16S rDNA的可变区及真菌ITS1区域进行测序,分析比较不同龄期、饲料条件对洋虫内共生菌群落结构及多样性的影响。不同龄期选择幼虫期和成虫期;饲料选择实际饲养洋虫常用的两种配比方案(饲料1大枣含量占饲料成分40%,不含人参,饲料2人参含量占饲料成分40%,不含大枣)。从洋虫内共生菌中筛选秸秆降解菌株并进行秸秆发酵试验,分析筛选菌株降解秸秆的效果。试验结果如下:1.不同龄期洋虫内共生菌多样性不同龄期下,洋虫幼虫期以漫游球菌和乳酸菌为优势菌,成虫期以弧菌和肠球菌为优势菌。洋虫内共生真菌丰度在不同龄期下存在一定差别,子囊菌门在不同龄期下丰度值均处于较高水平。内共生菌参与了洋虫近乎全部的生命活动,不同龄期下洋虫内共生菌所参与的生命代谢活动有很大区别,体现在营养物质的代谢活动和包括信号传导在内的生命活动。2.饲料对洋虫内共生菌多样性的影响饲料对洋虫内共生细菌的菌群结构和菌群稳定性等方面均有一定影响。饲料1的优势菌科为弧菌科、肠球菌科、链球菌科,饲料2的优势菌科为弧菌科、肠球菌科。不同饲料饲养下洋虫内共生菌参与的生物代谢活动有一定差别,差异相对较大的有:辅因子和维生素代谢、膜转运、global and overview maps、氨基酸代谢。3.洋虫内共生秸秆降解菌的筛选及降解效果通过刚果红染色从洋虫内共生菌中筛选出9株秸秆降解菌,滤纸崩解试验进一步筛出2株菌株。秸秆经乳酸调节pH后于30℃分别与单一菌株、复合菌系进行发酵试验,结果表明,筛选菌株具备降解秸秆中的纤维素和半纤维素的能力,复合菌系较单一菌株效率更高,复合菌株3d、5d、10d、15d、20d秸秆的半纤维素降解率分别为 2.36%、14.30%、30.96%、39.43%、41.41%,较 YC-120 d半纤维素降解率39.13%、YC-1 20 d半纤维素降解率39.89%分别高出2.28%、1.52%。复合菌株纤维素降解率为 5.04%、22.52%、30.13%、32.44%、34.15%,较YC-1 20 d纤维素降解率32.32%、YC-1 20 d纤维素降解率30.23%分别高出1.83%、3.92%。本试验得到了不同龄期、不同饲料饲养下洋虫内共生菌的优势菌群、丰度及种类差异等结果并对洋虫内共生秸秆降解功能菌株进行筛选,探讨了筛选菌株对秸秆的降解效果。试验对洋虫内共生菌进行研究并应用于秸秆降解,对指导昆虫资源洋虫的实际生产和规范化开发利用有着重要意义,为实现我国秸秆生物质资源的高效利用和现代农业可持续发展提供了新的思路。
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