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[目 的]探究P38对PD模型小鼠认知功能的影响。[方 法]第一部分:PD模型小鼠认知功能、p38MAPK变化研究1、20只C57BL/6小鼠随机分为对照组和模型组,模型组:MPTP(30mg/kg)腹注C57BL/6小鼠,持续7天;对照组:相同剂量的0.9%生理盐水腹注C57BL/6小鼠,持续7天。2、行为学检测采用旷场实验(open-field test)和水迷宫实验(Morris water maze),给药后第1天进行旷场实验检测小鼠的自主活动水平,第10天进行水迷宫实验,观察各组小鼠给药后学习记忆的能力。3、采用蛋白印记分析各组小鼠给药后皮层、海马、中脑、小脑内TH、α-synuclein、p38、p-p38的表达情况。第二部分:体内p38抑制对PD模型小鼠认知功能的影响1、p38KI/+小鼠与野生型同窝对照各20只随机分为4组:WT对照组、WT帕金森组、p38对照组、p38帕金森组。WT帕金森组、p38帕金森组腹腔注射给予C57BL/6小鼠MPTP(30mg/kg)持续7天;WT对照组、p38对照组给予相同剂量的0.9%生理盐水,持续7天。2、行为学检测采用了旷场实验(open-field test)和水迷宫实验(Morris water maze),给药后第1天进行旷场实验检测小鼠的自主活动水平,给药后第10天进行水迷宫实验,观察各组小鼠给药后学习记忆的能力。3、采用蛋白印记反应分析各组小鼠给药后皮层、海马、中脑、小脑内TH、α-synuclein、p38、p-p38 的表达情况。4、对小鼠脑片进行免疫荧光检测,观察小鼠皮层、海马、中脑、小脑内TH、α-synuclein 阳性细胞的变化情况。第三部分:抑制p38对PD模型小鼠海马突触可塑性的影响1、高尔基染色:将小鼠取脑,切片,进行高尔基染色,观察小鼠脑内树突棘密度的变化。2、采用蛋白印记分析检测皮层、海马、中脑、小脑内GluR1、GluR2 NR2A(NMDAR2A)、NR2B(NMDAR2B)、p-glur1、p-glur2 的表达情况。3、体外实验:体外培养小鼠神经元细胞,使用MPTP、P38抑制剂SB203580作用于细胞,进行神经元活力检测、蛋白印记反应检测TH、α-synuclein的表达情况,观察神经元细胞的变化。[结 果]第一部分:结果显示PD模型小鼠认知功能受损,还观察到PD模型小鼠海马、中脑、小脑中p38MAPK的激活,提示PD模型小鼠出现的认知功能受损可能与p38MAPK信号通路异常激活密切相关。第二部分:结果显示p38MAPK抑制的帕金森小鼠脑内TH的表达相应增加,α-synuclein表达减少,提示p38MAPK的抑制可改善帕金森小鼠的学习记忆能力。第三部分:结果显示帕金森小鼠突触密度减少,抑制p38MAPK后树突棘增加,体外实验TH和α-synuclein的表达情况和体内实验结果相一致,提示,帕金森小鼠突触可塑性损伤,抑制p38MAPK可能改善帕金森小鼠突触可塑性。[结 论]1、帕金森小鼠认知功能障碍,p38MAPK异常激活。2、p38MAPK抑制可改善帕金森小鼠突触可塑性,改善帕金森小鼠的认知功能。3、p38MAPK异常激活可对损伤突触可塑性造成损伤可能为帕金森认知功能障碍的发病机制之一。