苜蓿(Medicago sp.)不仅营养价值丰富,而且适口性好,在新疆地区广泛种植。是畜牧业生产中的重要饲料。但近年“丛枝”、“花叶”症状的苜蓿病害普遍发生,严重影响了苜蓿产量及质量。本研究利用分子生物学技术对其病原进行了检测与鉴定。主要研究结果如下:1.提取了193株“丛枝”状病株的总DNA,并以植原体通用引物R16m F2/R16m R1和R16F2/R16R2对其进行巢式PCR扩增,在北疆23株样品中扩增到1.2 kb片段,检出率为16.8%,确定了该病原为植原体(phytoplasma)。构建的系统进化树结果表明,该植原体为16SrⅤ-B亚组成员,与榆树黄化植原体组(Elm Yellows Group,16SrⅤ)中卫矛白化(Euonymus Whitening)植原体的同源性高达99.3%。2.提取了109株“花叶”症状苜蓿植株的总RNA,并以AMV、SMV、CMV、BCMV、TMV的特异性引物序列进行RT-PCR检测,其中根据AMV基因组RNA1、RNA2、RNA33个组分设计的3对特异性引物,分别能扩增出700 bp、800 bp和810 bp的特异性目的条带,后经克隆及序列比对,确定该病原为AMV。构建的系统进化树结果表明,该AMV与已报道的AMV的HZ、425L、Lst、ADA4等10个株系聚为一个大组,属于AMVⅠ组。而其他引物并未扩增出目的条带,即未检测出SMV、CMV、BCMV、TMV的存在,也未发现复合侵染。3.本研究首次采用分子生物学技术确定了新疆发生的丛枝症状的苜蓿病害为丛枝病,花叶状的苜蓿病害为苜蓿花叶病毒病,且确定了其病原的分类地位,该结果可为此两种苜蓿病害的早期诊断、检测提供理论依据。