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济宁青山羊是分布于鲁西南地区的高繁山羊品种,具有常年发情、性成熟早、产量高、耐粗饲、羔皮品质好等特点,母羊一般60日龄即开始发情,90~120日龄即达到性成熟水平,均产羔率达283%。哺乳动物的乳腺为幼畜提供营养,对于物种的世代生存起着重要的作用。乳腺的生长发育和其生理功能的发挥,有赖于多种激素和生长因子的相互作用。为了研究济宁青山羊生后发育过程中不同年龄段生长激素受体(Growth hormone receptor,GHR)、胰岛素样生长因子I受体(Insulin like growth factor I receptor,IGF-IR)、胰岛素受体(Insuline receptor,INSR)和催乳素受体(Prolactin receptor,PRLR)在乳腺组织中的定位分布和表达规律。本试验应用HE染色观察乳腺的组织结构;应用SABC免疫组织化学法研究GHR、IGF-IR、INSR和PRLR的免疫阳性细胞在乳腺组织中的分布位置与表达规律;应用实时荧光定量RT-PCR技术,检测GHR mRNA、IGF-IR mRNA和INSR m RNA在不同年龄段济宁青山羊乳腺中的相对表达量;应用Western Blot法鉴定乳腺组织中GHR、IGF-IR和INSR特异性蛋白片段的大小。结果显示:Western Blot法检测出GAPDH、GHR、IGF-IR和INSR有特异性蛋白片段的存在,分别在36kD、70kD、55kD、50kD处。GHR、IGF-IR、INSR和PRLR的免疫阳性细胞主要分布在乳腺导管上皮细胞、基质细胞和血管内皮细胞的胞质中,细胞核偶有表达,其中GHR平均积分光密度值大于IGF-IR的值,二者的变化趋势基本一致。GHR、IGF-IR阳性细胞平均光密度在出生当天至60日龄(初情期)迅速上升(P<0.01),90日龄时有所下降,120日龄(性成熟)升高到另一个峰值,之后呈下降趋势。GHR mRNA和IGF-IR mRNA表达趋势与其平均积分光密度值的变化趋势基本一致,但后者的表达量低于前者。GHR mRNA和IGF-IR mRNA在出生后表现上升的状态,60日龄达到峰值(P<0.05),而后90日龄时有所下降,120日龄后呈上升趋势(P<0.01),随后下降。INSR阳性细胞平均积分光密度值出生当天表达水平相对比较低,30日龄时上升显著(P<0.01),60~90日龄之间为下降状态,120日龄上升(P<0.05),150~180日龄稳定在一个较高的表达水平状态。INSR m RNA与其平均积分光密度值变化趋势相似。PRLR阳性细胞平均光密度值出生当天表达水平相对比较低,30日龄即开始升高(P<0.05),30~90日龄一直处在平稳升高的状态,但是差异不显著(P>0.05),120日龄快速上升(P<0.01),120~180日龄处于平稳下降状态,但是差异不显著(P<0.05),并且稳定在相对较高表达水平。综上所述,GHR、IGF-IR、INSR和PRLR共同作用调控乳腺的生长发育,而且初情期(60日龄)和性成熟期(120日龄)可能是乳腺发育最快的时期,性成熟之后乳腺结构趋于完善,为将来妊娠期功能性乳腺发育做好准备。