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【背景】大量体内外实验证实,肿瘤的生长、转移、复发和预后均与肿瘤血管生成密切相关。因此,以肿瘤血管生成为靶点,开发血管生成抑制剂在抗肿瘤研究中是一个十分活跃的研究领域。某些化疗药物,在小剂量、高频率的给药方式下可以选择性地显著抑制肿瘤组织内新生血管内皮细胞的生长,使肿瘤细胞因为血供不足而生长受阻。这称为小剂量化疗(metronomic chemotherapy)或抗血管生成化疗(antiangiogenic chemotherapy)。热疗(hyperthermia)是通过加热使肿瘤组织的温度达到40~44℃,引起细胞生长受阻与死亡的一种治疗方式。实验证明热疗具有抗血管生成的作用。中医药治疗肿瘤具有独到的疗效。近年来发现某些中药制剂及中药来源的药物有抗血管新生作用。【目的】本实验旨在国内外现有的研究基础上探讨L-OHP、复方苦参注射液及联合热疗对体内外血管生成的抑制作用。【方法】采用MTT法观察奥沙利铂(L-OHP)、复方苦参注射液联合热疗对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)、人结肠癌LOVO细胞增殖的影响;采用transwell板,观察L-OHP(L-OHP)、复方苦参注射液对HUVEC迁移的影响;采用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型,观察L-OHP、复方苦参注射液对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管的抑制作用。热疗方法采用电热恒温水浴法加热至43℃,持续30min。【结果】1.L-OHP在0.5-16μg/ml时体外具有抑制HUVEC增殖的作用(细胞存活率在80.1%-42.5%),细胞存活率与浓度呈负相关(相关系数r及P值分别为-0.943、0.005),此浓度范围内对人结肠癌LOVO细胞增殖的抑制明显低于对HUVEC的抑制,具有明显差异细胞毒作用。0.5μg/ml、1μg/ml及16μg/ml L-OHP联合热疗体外具有抗血管生成的协同效应,2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml L-OHP联合热疗体外具有抗血管生成的次加效应。复方苦参注射液在6.25-200μl/ml时体外具有抑制HUVEC增殖的作用(细胞存活率在82.2%-32.5%),细胞存活率与浓度呈负相关(相关系数r及P值分别为-0.972、0.001),此浓度范围内对人结肠癌LOVO细胞增殖的抑制明显低于对HUVEC的抑制,具有明显的抗血管生成作用。12.5μl/ml和25μl/ml复方苦参注射液联合热疗体外具有抗血管生成的协同效应,6.25μl/ml、50μl/ml、100μl/ml和200μl/ml复方苦参注射液联合热疗体外具有抗血管生成的次加效应。2μg/ml L-OHP和25μl/ml复方苦参注射液体外对HUVEC增殖的抑制率分别为31.6%、32.1%,联合应用后的抑制率为54.4%,具有协同作用。2.L-OHP在剂量为0.25~2μg/ml时,体外可明显抑制HUVEC迁移,并呈剂量依赖性,迁移的HUVEC数随着L-OHP浓度的增加而减少(r=-0.961,P=0.039)。复方苦参注射液在剂量为3.125~25μl/ml时,体外可明显抑制HUVEC迁移,并呈剂量依赖性,迁移的HUVEC数随着L-OHP浓度的增加而减少(r=0.954,P=0.046)。0.5μg/ml的L-OHP联合6.25μl/ml的复方苦参注射液体外可发挥协同抑制HUVEC迁移的作用。3.L-OHP在0.25~4μg/ml时体内对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管具有明显的抑制作用,并随浓度增加抑制作用明显增加。3.125μl/ml-50μl/ml复方苦参注射液体内对鸡胚绒毛尿囊膜具有明显的血管抑制作用,并与浓度呈正相关。联合0.5μg/ml的L-OHP和6.25μl/ml的复方苦参注射液体内对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管均具有明显的抑制作用,两者联合后抑制的鸡胚数增多。【结论】小剂量L-OHP和复方苦参注射液在体外具有抑制血管内皮细胞增殖、迁移作用和体内具有抑制鸡胚尿囊膜新生血管的形成作用,提示其在体内外均具有抗血管生成活性;联合热疗体外具有抗血管生成协同或次加效应,两者联合体外具有抗血管生成协同效应。