人胎盘核糖核酸酶抑制剂在大肠杆菌中的克隆与表达

来源 :北京师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lanrengbuluo
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
核糖核酸酶抑制剂(RibonucleoseInhibitor,RI)广泛分布于哺乳动物的各种组织器官中,尤以胎盘中含量最为丰富。 来源于人胎盘的核糖核酸酶抑制剂(PlacentalRibonucleaseInhibitor,PRI)与核糖核酸酶A以1∶1比例紧密结合成复合物,抑制90%以上的酶活性。PRI与核糖核酸酶A的结合能凋节细胞内的RNA代谢,对细胞的生理功能造成很多影响;PRI还能与血管生长因子(angiogenin,ANG)紧密结合,能够阻断细胞对血管生长因子的粘附和强烈抑制血管生长因子活性,从而具有抗肿痛作用。 本研究的目的就是获得核糖核酸酶抑制剂基因-RNH在大肠杆菌中的克隆与大量表达。为了使得核糖核酸酶抑制剂能够在大肠杆菌中成功地、稳定地表达,必须确定其克隆基因序列正确无误。首先将核糖核酸酶抑制剂基因RNH插入T质粒载体中,转化大肠杆菌菌株DH5a。经测序无误后再将该基因连接表达载体pQE-30上,接着转入大肠杆菌菌株M15中。经过IPTG的诱导表达,在大肠杆菌中大量表达核糖核酸酶抑制剂。 克隆和大量表达高活性的核糖核酸酶抑制剂使得对蛋白分子高级结构和它的生物学功能的研究成为可能,进而研究其与血管生长因子结合的分子机制,以及作为抑制血管生成药物抗肿瘤形成的分子机制。
其他文献
酿酒酵母是重要的工业微生物,广泛应用在工业酒精、酒类饮料等食品的发酵生产上,然而发酵过程中发生的高温、酸、碱等环境逆境严重影响酵母菌株的发酵效果。从基因表达调控水平
鉴定调控蛋白在基因组上的结合位点对于研究蛋白质-DNA的相互作用以及鉴定调控蛋白的靶基因具有重要意义。本论文首次建立了应用紫外激光交联/免疫沉淀技术筛选与蛋白质结合
全文分为三章: 第一章生物入侵的背景资料及研究进展 生物入侵是指某种生物从原来的分布区域扩展到一个新的地区,其后代在新的区域里繁殖、扩散,并对当地生态系统造成一
油气开发等人类活动引起以古尔班通古特沙漠为核心的准噶尔盆地局部地区环境严重退化,威胁工程安全运营与绿洲生态安全。本研究以新疆北水南调工程沿线经过的古尔班通古特沙漠
Meromorphic Mellin symbols arise in questions of characterizing elliptic regularity and the other singularities as well,and the comstruction of pseudo-different
Adducin是一种细胞膜骨架蛋白,由a、β和γ三种亚基组成,它不仅参与细胞膜骨架网状结构的构建和维持,同时还参与细胞信号传导及细胞膜离子转运,尤其与多种钠离子的转运机理密切相
大规模发展风力发电是解决能源紧缺和环境危机的必然趋势,另一方面,大量电力电子设备的使用,给电网带来了大量的谐波。因而在风力发电系统中有效实现最大风能追踪(Maximum Power Point Tracking, MPPT),并充分发挥风力发电系统并网装置的作用进行谐波治理,可以有效提高风力发电系统的风能利用效率,并提高电网供电的电能质量。因而,本文对MPPT和风力发电并网滤波功能两方面的风力发电
蛋白质合成是细胞内最重要的生命活动之一。在所有活细胞中,核糖体是蛋白质合成所必需的细胞器。真核生物中成熟的核糖体包括79种核糖体蛋白和4种核糖体RNA。核糖体蛋白作为核
近年来,可再生清洁能源得到了大力发展,然而以风力、光伏发电为代表的新能源具有间歇性、随机性波动性及不确定性等特点,随着清洁能源渗透率不断提高,风电功率的波动性给电网的安
基因芯片技术的发展使得研究人员能够在单次实验中同时检测数千甚至上万个基因的mRNA转录表达水平。基因芯片这一强大的技术手段改变了生物学家认识、研究世界的方式,从传统的