【摘 要】
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本实验首次对罗布泊“大耳朵”地区盐壳盐土中的嗜(耐)盐细菌进行分离,明确其种群组成分布特点,研究其产酶特性。从罗布泊“大耳朵”地区盐壳及土样中分离出108株嗜(耐)盐细
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本实验首次对罗布泊“大耳朵”地区盐壳盐土中的嗜(耐)盐细菌进行分离,明确其种群组成分布特点,研究其产酶特性。从罗布泊“大耳朵”地区盐壳及土样中分离出108株嗜(耐)盐细菌。比较了不同培养基的分离效果,以添加罗布泊盐壳浸提物的CM改良培养基更有利于嗜(耐)盐细菌的富集培养和分离。测定罗布泊嗜(耐)盐细菌生长的pH,NaCl耐受范围及对Na+、K+、Mg2+、Ca2+的选择适应性。大多数菌株的最适生长pH值是7.0~8.0。分离菌株中,中等嗜盐细菌、极端嗜盐细菌和耐盐细菌的比例分别为24%,27%,49%。多数嗜盐细菌对Na+、K+、Mg2+有广泛的适应性,选择性不强。少数嗜盐细菌对Na+,K+,Mg2+,Ca2+具有专一的选择适应性。采用ARDRA,ERIC-PCR,16S rDNA序列测定分析罗布泊嗜(耐)盐细菌的多样性,表明分离的菌株分布于10个属及两个独立的分支。Shannon多样性指数为2.827,Margalef丰富度指数为2.349。还发现了2个可能的新种和新属,显示出罗布泊嗜(耐)盐细菌具有独特丰富的生物多样性。针对工业生产中较重要的功能酶类,进行了产酶菌筛选。在分离到的108株嗜(耐)盐菌中,淀粉酶生产菌有25株,蛋白酶产生菌有30株,脂肪酶生产菌有14株,纤维素酶产生菌有4株。筛选出较高酶活的嗜盐淀粉酶和嗜盐蛋白酶菌株。通过对产嗜盐性淀粉酶和蛋白酶菌株的复筛及酶学性质的研究,罗布泊嗜(耐)盐细菌所产淀粉酶和蛋白酶以中性淀粉酶和碱性蛋白酶为主。发现这两种酶保持较高的酶活力依赖于一定浓度的NaCl,表现出嗜盐酶的特性。且这两种酶都具有较强的热稳定性,具有较为广泛的pH耐受范围。试验通过单因子和多因子正交试验证明,菌株LY087摇瓶发酵产生淀粉酶的最佳条件为:初始pH8.0、NaCl浓度10%、4%酵母膏、1%玉米粉。菌株LY060摇瓶发酵产生蛋白酶的最佳条件为:即初始pH9.0、NaCl浓度10%、4%酵母膏、4%玉米粉。
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