几丁糖/海藻酸敷料对海水浸泡创面作用的实验研究

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目前在日常生活及临床应用的止血敷料只有单纯的止血作用;近年开发的生物敷料也仅适用于表浅的清洁创面,旨在促进创面愈合,对战创伤创面尤其海战伤缺乏针对性。本课题组研制以几丁糖、海藻酸钙以及聚乙烯醇(PVA)复合而成的新型敷料,旨在研究集止血、消炎、防水、促进愈合、短时间不需更换等优势于一体的复合型敷料可供使用,对减少海水浸泡伤员伤残和死亡有重要作用。通过动物实验研究上述敷料是否具备上述功能及为临床应用提供依据。第一部分几丁糖/海藻酸敷料止血性能的实验研究[目的]:研究该新型敷料:几丁糖/海藻酸敷料(本项目组自行研制,已申请国家专利)的止血性能。[方法]:取新西兰兔4只,在背部两侧对称性剪5个直径1cm的圆形创口,分别用与创面大小相当的几丁糖/海藻酸敷料和明胶海绵止血,观察与创面的粘附情况,记录出血时间;止血停止后,将几丁糖/海藻酸敷料和明胶海绵放入预先配制好的氰化高铁血红蛋白检测试剂中仔细清洗,用分光光度计在540nm波长处光度比色,测出的Hb光度吸收值表示出血量。[结果]:几丁糖/海藻酸敷料与创面粘附较好,几丁糖/海藻酸敷料组、明胶海绵组的出血时间分别为87.7±19.1秒、170.7±22.6秒,Hb光度吸收值分别为1.131±0.44、1.733±0.733,经统计学分析,两组数据都有显著性差异(P<0.01),几丁糖/海藻酸敷料组明显优于明胶海绵组。[结论]:几丁糖/海藻酸敷料具有较好的止血性能。第二部分几丁糖/海藻酸敷料对海水浸泡创面愈合作用的实验研究[目的]观察几丁糖(chitosan, CTS)/海藻酸(alginate, ALG)敷料对大鼠海水浸泡创面的作用。[方法]取健康SD大鼠25只,体重250~300 g,于脊柱两侧切取直径1.8 cm圆形创面,制作皮肤创面模型,左侧为实验组,右侧为对照组。将创面浸泡于预先配置的人工海水中1 h,实验组采用CTS/ALG敷料外敷,对照组用无菌纱布外敷,行大体观察并记录创面愈合时间;术后3、5、7、10、12 d切取包括创面在内的2 cm×2 cm皮肤标本,行HE染色和免疫组织化学Envision法染色,观察创面的组织学改变及EGF、bFGF表达情况。[结果]实验组创面炎性反应轻,结痂收缩较快;对照组创面结痂收缩较慢。实验组创面完全愈合时间为(11.68±0.57)d,对照组为(12.51±0.54)d,比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验组自术后第3 d开始依次出现肉芽组织增生及细胞浸润,胶原组织增生、创面皱缩及上皮化,到术后10 d,胶原组织已排列整齐,上皮化过程基本完成,可见皮肤附件出现,术后12 d完全愈合;对照组相应时间点细胞浸润出现晚,且出现肉芽组织伴溃疡,上皮化过程较晚。免疫组织化学观察示实验组术后3、5d bFGF在血管内皮细胞和间质纤维母细胞内高表达、EGFR在血管内皮细胞内高表达;术后7、10、12d呈低表达;对照组术后相应时间点呈低表达和无表达。[结论] CTS/ALG对海水浸泡创面具有促进愈合作用,但其机制仍有待进一步深入研究。
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