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硫酸新霉素（neomycin sulphate）系氨基糖苷类广谱抗生素,其凭借稳定性强、价格低廉、促进生长等优势,在畜牧业中广泛应用,是治疗畜禽肠道感染的首选药物之一。仔猪白痢（white scour of piglets）是由致病性大肠杆菌引起的一种急性肠道传染病,发病率较高,治疗不及时,会严重制约仔猪的生长发育。目前,国内已上市的硫酸新霉素可溶性粉仅用于治疗鸡革兰氏阴性菌引起的胃肠道感染,尚未见其应用于猪的研究和报道。故本试验对硫酸新霉素可溶性粉治疗仔猪白痢的药效学、安全性和残留进行了初步研究,为临床应用提供理论基础。本研究包括如下内容:1硫酸新霉素可溶性粉治疗人工诱导仔猪白痢的药效学研究本研究旨在考察硫酸新霉素可溶性粉对人工诱导仔猪白痢的治疗效果,为临床扩大试验提供参考剂量。参照农业部颁发的《兽药注册资料汇编》,采用猪源产肠毒素大肠杆菌（CVCCC196株）感染4～6日龄仔猪建立人工诱导的仔猪白痢模型,并设立低（0.012 g·kg-1）、中（0.024 g·kg-1）、高（0.047 g·kg-1）剂量组及阳性、阴性和药物对照组（硫酸安普霉素可溶性粉组）,通过临床症状、体重变化等指标综合判定各组的治疗效果。结果显示:在舍温为18～20℃、环境相对湿度为80%～90%的条件下,以60×109CFU/头剂量的CVCC196菌悬液灌服接种4～6日龄仔猪可成功建立仔猪白痢模型;硫酸新霉素可溶性粉以中、高剂量连续给药5 d,治愈率和有效率均达90%,疗效明显,且效果优于硫酸安普霉素可溶性粉（治愈率和有效率分别为50%、60%）,具有较大的应用价值。综上,硫酸新霉素可溶性粉以临床推荐剂量0.024 g·kg-1连续使用5 d,对人工诱导的仔猪白痢具有良好的治疗作用,可推广于临床试验。2硫酸新霉素可溶性粉治疗自然感染仔猪白痢的药效学研究本研究旨在评价硫酸新霉素可溶性粉对自然发生仔猪白痢的疗效,为兽医临床应用提供理论依据。通过临床症状和实验室病原学检查选择典型仔猪白痢病例156头,随机分为2组,分别按0.024 g·kg-1和0.125 g·kg-1剂量灌服硫酸新霉素可溶性粉和硫酸安普霉素可溶性粉进行治疗,通过观察临床症状、体重变化等指标综合判定各组的治疗效果。结果表明,硫酸新霉素可溶性粉以临床推荐剂量（0.024 g·kg-1）连续使用5 d,可快速缓解仔猪病情,疗效显著,治愈率为91.89%,有效率为97.30%,平均疗程为2.87 d,均优于硫酸安普霉素可溶性粉（治愈率为82.19%,有效率为90.41%,平均疗程为4.05 d）。综上所述,硫酸新霉素可溶性粉在临床推荐剂量（0.024 g·kg-1）下连续给药5 d对临床自然感染的仔猪白痢具有较好的疗效。3硫酸新霉素可溶性粉对靶动物猪的安全性评价本研究旨在评价硫酸新霉素可溶性粉对靶动物猪的安全性。试验参考《VICH兽药靶动物安全性研究指导原则》,将32头20日龄断奶仔猪随机分为4组,分别为1倍（0.024 g·kg-1）、3倍（0.072 g·kg-1）、5倍（0.120 g·kg-1）临床推荐剂量组和空白对照组,连续混饮给药15 d,考察各组试验动物的临床表现、血液生理生化、尿常规、解剖学及病理组织学等方面的情况,综合评价硫酸新霉素可溶性粉对靶动物猪的安全性。结果显示,各剂量组的临床表现与对照组均无差异,均表现为精神状态佳、活动自如及食欲旺盛等;各剂量组的尿常规指标、解剖学及病理组织学检查与对照组均正常,且差异不显著（P＞0.05）,仅个别仔猪的血液生理生化指标与对照组相比,存在显著变化,但均在正常参考范围内。由此说明,硫酸新霉素可溶性粉以5倍临床推荐剂量（0.120 g·kg-1）范围内混饮给药15 d,对靶动物猪较为安全。4硫酸新霉素可溶性粉在猪体内的残留研究本研究旨在确立猪可食性组织中硫酸新霉素的检测方法及临床应用硫酸新霉素可溶性粉的休药期。将20头猪（45 kg左右）随机分为5组,按临床推荐剂量（0.024 g·kg-1）连续混饮硫酸新霉素可溶性粉5 d,于给药前和停药后的0.5、1、3、5 d进行剖杀取样,采用超高效液相色谱-串联质谱仪对组织内的待测药物进行定量分析,以考察硫酸新霉素在猪可食性组织中的残留规律。猪肌肉、肝脏和肾脏组织经0.01 M PBS和10%三氯乙酸水溶液（含0.4 mM Na2EDTA）提取,猪脂肪组织经10%三氯乙酸甲醇溶液提取,通过Oasis MCX固相萃取柱净化后,进行检测分析。结果表明,该法的检测限（LOD）与定量限（LOQ）分别为50μg·kg-1和100μg·kg-1;待测药物在100～20000μg·kg-1基质添加范围内的标准曲线线性良好（R2＞0.99）,平均添加回收率在83.07%～103.38%之间,批内、批间的相对标准偏差均小于10.65%,且稳定性良好;残留检测结果显示,停药24 h后,仔猪各组织中硫酸新霉素的含量均低于国家规定的最高残留限量,停药5 d后基本低于定量限。综上,本研究成功建立了猪可食性组织（肌肉、脂肪、肝脏和肾脏）中硫酸新霉素残留量检测的超高效液相色谱-串联质谱法,建议硫酸新霉素可溶性粉按0.024 g·kg-1剂量混饮给药5 d的临床休药期为3 d。