猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhoea virus,PEDV）是一种高接触性动物病毒,能引发毁灭性肠道传染疾病,致死率极高,严重影响食品原料安全。由于现存分析方法的局限性,发展新的分析方法对保障食品安全具有重要的意义,特别是构建速度快、灵敏度高、过程简单的方法用来检测PEDV尤为重要。电化学发光（Electrochemiluminescence,ECL）,是一种结合电化学和光谱学的功能强大的分析技术,在痕量目标物检测中具有潜在的应用前景。目前以ECL为手段的检测方法主要存在几个问题:第一,ECL信号弱,难以达到所需要的灵敏度;第二,有些共反应剂体系,如三正丙胺作共反应剂时,具有毒性,挥发性和腐蚀性;第三,传统材料的背景信号高,稳定性较差。本文针对以上背景,结合信号放大技术、新型共反应剂和新材料的合成及不同的信号输出方式等手段研究了PEDV的灵敏、安全、稳定和快速的分析检测。主要内容从以下四章展开:1、基于滚环放大和DNA修饰的联吡啶钌掺杂二氧化硅纳米粒子标签的电化学发光法检测PEDV抗体低丰度蛋白的超敏检测对于各种病毒的早期诊断具有重要意义。为了达到满意的结果,本章提出了一种新的多途径信号放大策略,构建了PEDV抗体的高灵敏电致发光传感器。该传感以抗体-抗原反应为识别单元,金纳米颗粒修饰石墨烯纳米片为基底,以级联的联吡啶钌掺杂二氧化硅纳米粒子与DNA相连为信号标签,滚环扩增技术增强信号,对ECL信号实现了放大,实现对PEDV抗体的灵敏检测。该方法的检测限为0.05 pg/m L（S/N=3）,检测范围为0.1 pg/m L到5 ng/m L。该方法制备简单,操作快速,灵敏度高,稳定性好,并成功用于血清中的PEDV抗体的定量分析。2、卟啉锆基金属有机框架PCN-224（Zirconium-Based Porphyrinic Metal-Organic Framework）的电化学发光特性研究以中-四（4-羧基苯基）卟吩（meso-tetrakis（4-carboxyphenyl）porphyrin,TCPP）结合锆簇而形成的金属有机框架PCN-224,是一种多孔的立方体结构,具有大的比表面积和较稳定的光化学性质。作为一种新的电化学发光材料,重点探索了湮灭电化学发光机理和共反应剂的电化学发光相关性质。结果表明,PCN-224具有湮灭途径的电化学发光;在0.05 mol/L K2S2O8为共反应剂的溶液中,ECL信号强且稳定,其发光效率达到6.8%。本研究探索了新型的电化学发光材料,不仅完成了PCN-224的ECL性能的基础研究,而且为PCN-224复合材料构建ECL生物传感器开辟了道路。3、基于TiO2敏化PCN-224的电化学发光信号开关用于PEDV检测以TiO2放大PCN-224电化学发光信号,本章构建了基于新型三元ECL体系PCN-224/K2S2O8/TiO2的生物传感器用于PEDV检测。采用TiO2纳米颗粒作为共反应促进剂,在阴极促进了共反应物K2S2O8的还原化过程,并显著提高了PCN-224的ECL信号,得到放大的初始信号。采用Signal-off检测模式发展了PEDV的ECL生物传感器,该方法在1 pg/m L到10 ng/m L浓度范围之间具有良好的线性关系,检测限低至0.4 pg/m L（S/N=3）。该方法丰富了PCN-224/K2S2O8体系在ECL系统中的应用,为生物分析提供了一种新的策略。4、Pt-Au空心棒增大鲁米诺信号与PCN-224比率型ECL用于PEDV检测为了提高猪流行性腹泻病毒检测的灵敏度,基于电化学发光能量共振转移（ECL-RET）原理,以鲁米诺作为能量供体,PCN-224作为能量受体,设计了一种比率型电化学发光传感器用于PEDV的检测。在饱和氧气的过硫酸钾溶液中,Luminol利用共反应剂O2产生强的ECL信号,空心的金铂棒利用其催化作用对ECL信号进行放大;当有目标物存在时,PCN-224的浓度增加,Luminol的ECL信号会被PCN-224以过硫酸钾做为共反应剂产生的信号所猝灭。所构建的生物传感器,在0.01 pg/m L到10 ng/m L范围内PEDV的浓度与ECLPCN-224/ECLLuminol的值呈现良好的线性关系,检测限为3 fg/m L（S/N=3）。利用Luminol-PCN-224作为ECL-RET体系中新的供体-受体对,在ECL生物分析应用中具有很大潜力。