目的:制作新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型,观察不同时期应用高压氧(HBO)治疗对缺氧缺血性脑损伤大鼠海马CA1区组织学及对改善其学习记忆能力的影响,进一步揭示应用高压氧治疗对海马CA1区神经细胞的骨架蛋白微管相关蛋白2(MAP-2)表达的影响,从而探讨高压氧在神经细胞修复与再生过程中的作用机理。 方法:新生7日龄Wistar大鼠为实验动物,雌雄不限,采用结扎左侧颈总动脉后通8%低氧的经典方法制作大鼠缺氧缺血性脑损伤模型,并随机分为HIBD组(n=12)、HBO早治组(n=12)、HBO晚治组(n=8),假手术组(n=12),空白对照组(n=6)。HBO早治组于造模后4小时应用HBO,晚治组于造模后14天应用HBO,治疗压力均为0.2MPa,每次60min,每天一次,共用7天。HBO早治组14日龄治疗结束后处死6只,相应对照组取一批与之对照;剩余6只同其它组大鼠喂养至造模后21天(28日龄),应用避暗法测试学习记忆能力后30日龄时处死。各组动物在相应时点处死后取脑组织,作HE染色并用免疫组化染色方法检测海马CA1区微管相关蛋白2(MAP-2)的表达情况,以评价不同时期应用HBO对HIBD的治疗效果。 结果:脑组织常规病理空白对照组及假手术组未见异常。14日龄时HIBD组左脑皮质呈灶状、片状变性、坏死、软化、液化及空洞形成,海马CA1区锥体细胞排列紊乱、疏松,层次不清,神经元及胶质细胞严重皱缩深染,核缩小呈梭形或三角形,核仁不清,与假手术组差异明显;HBO早治组左脑皮质及海马CA1区细胞形态及结构基本同假手术组,但锥体细胞层次较薄。30曰龄时HIBD组左脑萎缩明显,坏死区胶质细胞增生显著,海马CA1区锥体细胞排列紊乱,细胞间隙大,层次不清,可见出血,与假手术组差异明显;HBO早治组基本同假手术组,但锥体细胞层较薄;HBO晚治组左脑有萎缩,海马。CA1区与HIBD组相似,但神经元数目较之多。 MAP-2在空白对照组及假手术组中主要是在神经元的胞体及突起阳性表达。HIBD组不同时间点阳性表达均减少,海马CA1区锥体神经元排