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背景:酒精性肝损伤是由于过度饮酒导致的一种肝脏疾病,研究表明,酒精性肝损伤主要是由于酒精引发的肝脏内的氧化应激反应,初期通常表现为脂肪肝,进而可发展为酒精性肝炎、肝纤维化和肝硬化,目前尚未找到可靠的治疗方案。果糖-1,6-二磷酸(FDP)是一种糖酵解中间产物,已经有研究证明FDP不仅能通过提高厌氧碳水化合物的含量和抑制中性粒细胞氧自由基的生成,减轻与缺血和休克相关的组织损伤,同时也可激活磷酸戊糖途径(PPP)厌氧产生ATP。此外,有研究也表明FDP上调葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性,在细胞水平保持谷胱甘肽和过氧化氢酶的水平。因此,本文在此基础上研究了 FDP对酒精性肝损伤的抑制机理。目的:本实验从生化和组织病理学两个角度观察不同剂量的FDP对小鼠急性酒精肝损伤的抑制作用,并且探讨其作用机制。方法:运用比色法检测小鼠血清中ALT、AST活性和TG的水平,以观察FDP对急性酒精肝损伤的抑制作用;运用比色法检测肝脏中MDA的含量和一系列抗氧化酶的活性,分析FDP对肝脏脂质过氧化和抗氧化能力的影响;使用免疫组化方法检测肝脏中CPY2E1的蛋白水平、ELISA检测肝脏中乙醛脱氢酶(ALDH)的含量、比色法检测肝脏中乙醇脱氢酶(ADH)的活性,分析FDP对与酒精代谢有关的酶的影响;运用MTT法检测FDP对细胞活力以及FDP对酒精刺激后的L02细胞活力的影响;运用流式细胞术检测FDP对酒精刺激后细胞凋亡的影响;运用免疫印迹法检测肝脏中与线粒体凋亡有关的pro-caspase3和cleaved PARP的蛋白水平,分析FDP对酒精引起的急性肝损伤细胞凋亡的信号通路的激活的影响;运用HE染色组织病理学分析FDP对肝组织的保护作用。结果:我们发现1)FDP能够剂量依赖性地抑制酒精诱导的小鼠血清中ALT、AST活性和TG含量的上升;2)HE染色结果显示FDP能够明显减轻酒精诱导的肝组织形态学的改变;3)FDP能够使酒精刺激过的L02细胞活力上升并且抑制细胞的凋亡;4)FDP能够剂量依赖性地减轻酒精肝损伤造成的脂质过氧化和氧化应激反应;5)FDP能够升高ADH活性和ALDH含量刺激酒精代谢、降低CYP2E1的蛋白水平抑制酒精的代谢激活。结论:FDP作为糖酵解过程中的一种中间产物,能够通过抑制氧化应激和刺激酒精代谢抑制酒精肝损伤。