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目的：研究他克莫司、罗格列酮单独以及联合应用对TNF-α诱导的HaCaT细胞体外增殖、凋亡、分化的影响，观察他克莫司与罗格列酮联合应用对TNF-α诱导的HaCaT细胞体外增殖的抑制作用与诱导分化作用是否具有协同效应，并探讨其相关机制，为他克莫司联合罗格列酮治疗特殊人群银屑病(如糖尿病合并银屑病)提供实验和理论依据。 方法：以TNF-α诱导的永生化人角质形成细胞株HaCaT细胞为银屑病角质形成细胞炎性模型。采用CCK-8法检测他克莫司与罗格列酮单独以及联合应用对TNF-α诱导的HaCaT细胞体外增殖的抑制作用；半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)测定他克莫司与罗格列酮单独以及联合应用对TNF-α诱导的HaCaT细胞分化标志物外皮蛋白与角蛋白6 mRNA表达的影响；流式细胞术检测他克莫司与罗格列酮单独以及联合应用对HaCaT细胞凋亡和细胞周期变化的影响；Western blot方法测定他克莫司与罗格列酮单独以及联合应用对TNF-α诱导的HaCaT细胞CyclinD1和P21表达的影响。 结果：1.CCK-8法检测结果表明TNF-α可有效诱导HaCaT细胞体外增殖，他克莫司(10μmol/L)，罗格列酮(10、20、40、80μmol/L)单独以及联合应用对TNF-α诱导的HaCaT细胞体外增殖均有不同程度的抑制作用，以上各浓度组单独应用对TNF-α诱导的HaCaT细胞体外增殖抑制率分别为：(21.74±5.36)％、(5.04±7.12)%、(12.56±6.93)%、(21.41±5.95)%、(39.17±8.03)%，他克莫司(10μmol/L)分别与罗格列酮(10、20、40、80μmol/L)联合应用对TNF-α诱导的HaCaT细胞体外增殖抑制率分别为：(27.60±6.68)%、(38.35±7.24)%、(48.60±8.40)%、(65.21±4.53)%。结果表明他克莫司与罗格列酮联合应用对HaCaT细胞的体外增殖抑制作用更强，与他克莫司、罗格列酮单独应用组比较差异有统计学意义(P<0.05)。2.RT-PCR检测结果表明他克莫司(10μmol/L)与罗格列酮(10、40μmol/L)单独应用48h后可不同程度的抑制TNF-α诱导的HaCaT细胞角蛋白6的表达、促进外皮蛋白的表达，角蛋白6与β-actin的荧光强度比值分别为：0.384±0.010、0.626±0.012、0.533±0.012，外皮蛋白与β-actin的荧光强度比值分别为：0.922±0.026、0.412±0.012、0.568±0.021，与TNF-α诱导组比较差异有统计学意义(P<0.05)。他克莫司(10μmol/L)与罗格列酮(10、40μmol/L)联合应用48h后对HaCaT细胞角蛋白6的抑制及外皮蛋白的促进作用显著增强，角蛋白6与β-actin的荧光强度比值分别为：0.215±0.012、0.120±0.021，外皮蛋白与β-actin的荧光强度比值分别为：1.087±0.011、1.253±0.016，与他克莫司、罗格列酮单独应用组相比较差异有统计学意义(P<0.05)。3.流式细胞术检测结果显示他克莫司(10μmol/L)和罗格列酮(10、40μmol/L)单独以及联合应用48h后，HaCaT细胞凋亡率分别为：(1.36±0.13)%、(1.47±0.09)%、(1.74±0.13)%、(1.97±0.10)%、(2.65±0.22)%，与TNF-α诱导组相比差异有统计学意义(P<0.05)，他克莫司与罗格列酮联合应用组较相应单独用药组诱导作用更强(P<0.05)。4.细胞周期检测结果表明他克莫司(10μmol/L)与罗格列酮(10、40μmol/L)单独及联合应用均可增加停滞在G0～G1期细胞的比例，其中他克莫司与罗格列酮联合应用组G0～G1期的细胞比例分别为：(46.47±0.43)%、(48.39±0.71)%，较相应单药组(44.78±0.54)%、(39.62±0.07)%、(40.99±1.05)%明显升高(P<0.05)，表明罗格列酮与他克莫司单独以及联合应用均可有效阻滞HaCaT细胞的周期进程，尤以联合应用组作用更强。5.Western blot检测结果表明他克莫司(10μmol/L)和罗格列酮(10、40μmol/L)单独作用于TNF-α诱导的HaCaT细胞48h后，均可不同程度的下调Cyclin D1、上调P21表达，Cyclin D1与β-actin的灰度值比值分别为：0.400±0.040、0.727±0.021、0.633±0.035，P21与β-actin的灰度值比值分别为：0.279±0.031、0.12±0.017、0.18±0.026，与TNF-α诱导组比较差异有统计学意义(P<0.05)。他克莫司(10μmol/L)与罗格列酮(10、40μmol/L)联合应用48h后对HaCaT细胞Cyclin D1的抑制及P21的上调作用显著增强，Cyclin D1与β-actin的灰度值比值分别为：0.317±0.021、0.220±0.010，P21与β-actin的灰度值比值分别为：0.387±0.025、0.453±0.021，与他克莫司、罗格列酮单独应用组比较差异有统计学意义(P<0.05)。 结论：1.他克莫司、罗格列酮单独以及联合应用可显著抑制TNF-α诱导的HaCaT细胞体外增殖、促进分化、诱导凋亡，尤以联合应用组作用更强；2.他克莫司、罗格列酮单独及联合应用可有效阻滞TNF-α诱导的HaCaT细胞细胞周期进程，且联合用药作用显著增强。3.他克莫司和罗格列酮单独及联合作用于TNF-α诱导的HaCaT细胞后，可下调Cyclin D1、上调P21的表达，并可能通过该机制发挥其抑制增殖、促进分化、诱导凋亡的作用。