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研究背景新生儿缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)是围产期的各种因素引起的新生儿缺氧和窒息,是新生儿死亡和伤残的主要原因,且目前尚无有效的治疗方法,可有效减轻围产期缺氧缺血(HI)造成的脑损伤,因此需要探索新的疗法来提高疗效。近年来研究表明,粒细胞集落刺激因子(granulocyte-colony stimulating factor,G-CSF)已成为一种具有重要临床潜力的新型神经保护剂,目前的确切机制尚未完全确定。有报导通过建立闭塞大脑中动脉(MCAO)SD大鼠模型,认为G-CSF通过减轻内质网应激发挥脑缺血的保护作用。然而,目前G-CSF对HIBD新生大鼠内质网应激的影响尚未清楚。目的探讨G-CSF对HIBD新生大鼠是否有神经保护作用及对内质网应激的影响,为G-CSF治疗HI脑损伤提供理论依据。方法54只7日龄新生SD大鼠采用数字表法随机分为3组,假手术组(sham组)、模型组(HIBD组)及给药组(G-CSF组),每组18只。模型组及G-CSF组采用Rice法建立HIBD模型,假手术组不作动脉结扎及缺氧处理。G-CSF组造模后1h腹腔注射50ug/kg G-CSF,假手术组及模型组同一时间注射相应剂量生理盐水。各组分别于造模后24小时取脑采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)法检测脑梗死面积的大小,苏木精-伊红(HE)染色观察大脑的病理变化,末端转移酶标记技术(Tunel)观察大脑皮层及海马CA1区神经细胞凋亡情况,采用免疫荧光检测各组大脑皮层葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达情况,采用western blot检测内质网.(ER)应激相关蛋白GRP78、CCAAT增强子结合蛋白(CHOP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)表达情况。结果造模后24小时,HE染色示假手术组未见明显神经元损伤表现,模型组可见脑组织结构改变明显,G-CSF组上述病理改变较模型组减轻。TTC染色结果示模型组及G-CSF组梗死面积较假手术组明显增加(均P<0.05),G-CSF组梗死面积较模型组减少(P<0.05)。免疫荧光结果示模型组及G-CSF组患侧大脑皮层GRP78阳性表达细胞比例较假手术组增加(均P<0.05),G-CSF组GRP78蛋白阳性比例较模型组减少(P<0.05)。Tunel染色结果示模型组及G-CSF组患侧海马CA1区及皮层凋亡细胞比例较假手术组明显增加(均P<0.05),G-CSF组较模型组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果示模型组及G-CSF组ER应激相关蛋白GRP78、CHOP、caspase-12相对表达水平较假手术组明显增加(均P<0.05),G-CSF组ER应激相关蛋白均低于模型组(P<0.05)。结论1.缺氧缺血可引起内质网应激;2.G-CSF可减轻内质网应激;3.腹腔注射G-CSF对HIBD新生大鼠有神经保护作用;4.G-CSF可能部分通过抑制内质网应激发挥脑保护作用。