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目的探讨自噬在A549/DDP细胞顺铂耐药中的作用及机制。方法采用MTS法检测A549/DDP细胞及其亲本A549细胞对DDP耐药性,计算A549/DDP细胞顺铂耐药指数。通过Western blot、激光共聚焦和透射电子显微镜等方法检测A549/DDP细胞及其亲本A549细胞的自噬活性。使用DDP处理A549/DDP细胞,Western blot和RT-qPCR检测DDP对自噬相关蛋白和基因表达的影响,初步探讨其潜在的机制。构建自噬关键基因敲低的A549/DDP细胞模型,采用MTS法验证自噬对DDP耐药性的影响。结果A549/DDP细胞对A549细胞顺铂耐药指数为6.22,为中等耐药细胞株。A549/DDP细胞中LC3B、ATG5、Beclin1和ATG7等自噬关键蛋白表达水平明显高于A549细胞。使用DDP处理A549/DDP细胞后,LC3B、ATG5、Beclin1和ATG7等自噬关键蛋白表达水平下降,ATG5、Beclin1和ATG7的m RNA表达水平也显著下降(p<0.05),且呈现出时间依赖性和剂量依赖性。DDP可通过下调AMPKα和MiTF表达水平(p<0.05),抑制细胞自噬。敲除ATG5或BECN1基因后使用DDP处理A549/DDP细胞,可显著增高细胞死亡率(p<0.05)。结论A549/DDP细胞具有更高DDP耐药性的同时表现出更高的自噬活性,DDP处理可以通过抑制AMPKα和MiTF信号通路抑制自噬。自噬在A549/DDP细胞对DDP的耐药中起保护作用,抑制自噬可导致DDP诱导的细胞死亡加重,可以逆转A549/DDP细胞的DDP耐药性。