糖肾康饮及拆方含药血清对高糖环境下肾小球系膜细胞的作用研究

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:JK0803_lichunfeng
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目的:通过研究糖肾康饮及其拆方组含药血清对高糖环境下体外培养的肾小球系膜细胞(GMCs)的增殖抑制作用,以及各组含药血清对于高糖诱导的细胞转化生长因子β1(TGF-β1)及层黏连蛋白(LN)水平的控制作用,来证实糖肾康饮的治疗效果及组方的合理性。方法:1.采用MTT方法检测糖肾康饮含药血清对高糖环境下培养GMCs增殖的抑制作用。2.采用倒置相差显微镜观察肾小球系膜细胞的形态变化。3.采用ELISA方法检测糖肾康饮各组含药血清对高糖环境下培养的细胞TGF-β1和LN水平的降低程度。4.采用流式细胞仪检测各组细胞周期变化。结果:1.糖肾康饮各组含药血清均可以不同程度的抑制高糖环境的GMCs的增殖,其中以全方组效果最为显著,各拆方组中,益气养阴组、活血化瘀组两组与温阳固肾组、健脾化浊组两组相比较,其作用效果更佳。2.通过镜下观察,明显可见高糖培养的细胞数量增多,体积增大,生长密集,细胞群可见重叠或联结成网状,异常增殖现象明显;加入糖肾康饮含药血清的细胞镜下可见不同程度形态改变,细胞皱缩,细胞核固化,出现凋亡小体,凋亡细胞数量明显增多,培养液中可见细胞碎片。3.糖肾康饮含药血清可以明显降低高糖环境下细胞培养上清液中TGF-β1和LN的浓度,各血清分组中又以全方组降低程度最为显著,各拆方组中,益气养阴组和活血化瘀组效果较另外两组更优。4.流式细胞周期检测发现,高糖能显著促进细胞由G1期进入S期,使G1期细胞比例降低,S期细胞比例升高,细胞凋亡受到抑制而发生增殖;糖肾康饮含药血清可以降低S期细胞比例,升高G1期细胞比例,阻滞细胞周期。结论:1.糖肾康饮对于高糖诱导的GMCs的异常增殖有显著的抑制作用,并且全方组作用优于各拆方组。2.糖肾康饮可以显著降低高糖体外培养GMCs的TGF-β1和LN水平,同时以全方组作用优于拆方组。3.糖肾康饮可以通过降低S期细胞比例,升高G1期细胞比例,使细胞周期发生阻滞,从而抑制GMCs过度增殖并促进增殖的细胞凋亡,此种作用效果仍以全方组最为显著。
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