CNNM3促进非小细胞肺癌的恶性表型及分子机制的研究

来源 :中国医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:niannian827
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目的:CNNM3是CNNMs蛋白家族的一员,CNNMs是一种含cyclin和CBS结构域的二价金属离子转运体,最初被发现时将其命名为古保守域蛋白(ACDPs)。近期有研究表明,CNNM3与PRL2相结合形成复合体通过调节细胞内Mg2+水平进而促进乳腺癌的发生和发展。然而,它在非小细胞肺癌中的作用尚不清楚。本研究致力于探索CNNM3在肺癌中的作用及功能。研究方法:为了澄清上述问题,我们收集了70例肺癌患者的组织学标本,通过免疫组化实验和统计学分析探讨了在肺癌组织中CNNM3表达量与正常组织中表达量的差别以及与临床病理因素的关系,并采用Kaplan-Meier数据库探索了CNNM3对非小细胞肺癌患者预后的影响。利用免疫印迹法检测了各个细胞系中CNNM3的表达。我们也利用免疫荧光实验检测了在A549细胞中CNNM3的表达分布情况。CNNM3在A549细胞中表达较高,所以我们选择A549细胞进行干扰。当我们敲低A549细胞中CNNM3后,肺癌细胞增殖能力通过MTT和克隆形成实验而得到验证。肺癌细胞侵袭能力的改变通过Transwell基质胶实验而得到证实。最后我们利用免疫印迹法分析了敲低CNNM3后上皮间质转化(EMT)相关蛋白及AKT/p-AKT在蛋白水平的改变情况。结果:1.CNNM3在各非小细胞肺癌组织中高表达,且在A549细胞中主要位于细胞质中,统计学分析结果说明了CNNM3在肺癌组织中的异常表达与临床因素TNM分期以及淋巴的结转移相关。Kaplan-Meier数据库检索结果显示CNNM3在肺癌患者中的高表达与患者的不良预后相关,CNNM3高表达的患者的生存时间明显短于CNNM3低表达的患者的生存时间。2.与HBE细胞相比,在各个肺癌细胞系中CNNM3的表达较高。而免疫荧光实验的结果显示CNNM3在A549细胞中主要定位于细胞浆。3.敲低CNNM3抑制了癌细胞的增殖、侵袭能力。4.敲低CNNM3能调节NSCLC细胞的EMT相关蛋白及磷酸化AKT蛋白的表达。结论:1.CNNM3在非小细胞肺癌中过表达并且与高TNM分期和淋巴结转移及肺癌患者的不良预后相关。2.CNNM3能够促进非小细胞肺癌细胞的增殖和侵袭。3.CNNM3能够调节非小细胞肺癌细胞EMT相关蛋白及p-AKT蛋白的表达。
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