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目的:通过观察健脾降浊中药香砂六君子汤对脾虚高脂血症大鼠失功能高密度脂蛋白(Dysfunctional high density lipoprotein,dy HDL)和胆固醇逆向转运(Reverse cholesterol transport,RCT)途径中相关基因及蛋白表达的影响,以dy HDL为切入点,探讨香砂六君子汤改善脾虚高脂血症大鼠血脂紊乱及肝脏脂质沉积情况的作用机制。材料与方法:75只SPF级SD大鼠随机分为正常对照组、高脂组、脾虚高脂组、香砂六君子低剂量组(5.67 g·kg-1·d-1)和香砂六君子高剂量组(11.34 g·kg-1·d-1)。脾虚高脂组、香砂六君子低剂量组和香砂六君子高剂量组采用饮食不节加力竭游泳的复合方法造脾虚模型,15天后脾虚造模成功,正常对照组喂饲基础饲料,高脂组、脾虚高脂组、香砂六君子低剂量组和香砂六君子高剂量组喂饲高脂饲料,自由摄食,饮水不限。高脂饲料喂饲14周后取材,取材前4周给予灌胃给药,香砂六君子低剂量组和香砂六君子高剂量组给予相应剂量药物,正常对照组、高脂组、脾虚高脂组给予等体积生理盐水。全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triacyl glyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(High-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)含量;间苯三酚法检测大鼠尿D-木糖排泄率;HE染色观察肝脏细胞形态变化;ELISA法检测血浆PON1、apo A1、SAA和血清PLTP、LCAT、CETP含量;实时荧光定量Q-PCR法检测大鼠肝脏PON1、apo A1、SAA、PLTP、LCAT和CETP基因m RNA表达,Western blotting法检测大鼠肝脏PON1、apo A1、SAA、PLTP、LCAT、CETP和CYP7A1蛋白表达。结果:1.香砂六君子汤对脾虚高脂血症大鼠血脂水平的影响与正常对照组相比,高脂组和脾虚高脂组大鼠血清TC、TG、LDL-C水平明显升高(P<0.05或P<0.01),HDL-C水平显著降低(P<0.01),且脾虚高脂组大鼠血脂变化幅度明显大于高脂组,但无统计学意义;与脾虚高脂组比较,香砂六君子汤低剂量、高剂量组大鼠血清TC、TG、LDL-C水平明显降低(P<0.01),HDL-C水平显著升高(P<0.01),香砂六君子汤不同剂量之间未见明显量效关系。2.各组大鼠尿D-木糖排泄率变化及香砂六君子汤干预作用与正常对照组相比,脾虚高脂组大鼠尿D-木糖排泄率显著降低(P<0.01),高脂组大鼠尿D-木糖排泄率较正常组比较,差异无统计学意义;香砂六君子汤干预后,大鼠尿D-木糖排泄率显著升高(P<0.05),其中,香砂六君子高剂量组大鼠尿D-木糖排泄率升高更为明显。3.香砂六君子汤对脾虚高脂血症大鼠肝脏组织病理形态的影响正常对照组肝细胞核圆、大而居中,细胞索条理清晰,肝窦正常;与正常对照组比较,高脂组和脾虚高脂组肝细胞肿大变圆,脂肪空泡明显,肝细胞形态异常,胞浆疏松,部分细胞核挤向胞膜,且与高脂组比较,脾虚高脂组大鼠肝脏细胞脂肪空泡明显增多,肝细胞异常明显;香砂六君子汤干预后大鼠肝脏细胞脂肪空泡显著减少,肝细胞肿胀减轻,细胞排列整齐清晰,胞核正常,且与香砂六君子低剂量组相比,香砂六君子高剂量组大鼠肝细胞状态改善更为明显。4.香砂六君子汤对血浆PON1、apo A1、SAA和血清PLTP、LCAT、CETP含量的影响与正常对照组相比,高脂组和脾虚高脂组大鼠血浆SAA及血清PLTP、CETP含量显著升高(P<0.01),血浆PON1,apo A1含量显著降低(P<0.01),血清LCAT含量变化呈现下降趋势,且脾虚高脂组大鼠血清LCAT和血浆PON1,SAA含量明显低于高脂组(P<0.05或P<0.01),血清PLTP、CETP含量明显高于高脂组(P<0.05);脾虚高脂血症大鼠经香砂六君子汤干预后,大鼠血浆SAA及血清PLTP、CETP含量明显降低(P<0.01),血浆PON1、apo A1和血清LCAT含量显著升高(P<0.01),其中,香砂六君子高剂量组血浆dy HDL及血清RCT途径相关蛋白含量变化更为明显。5.香砂六君子汤对肝脏PON1、apo A1、SAA、PLTP、LCAT和CETP基因m RNA表达的影响与正常对照组相比,高脂组和脾虚高脂组大鼠肝脏SAA、PLTP及CETP基因m RNA水平显著升高(P<0.01),PON1,apo A1及LCAT基因m RNA水平显著降低(P<0.05或P<0.01),且脾虚高脂组大鼠肝脏PLTP基因m RNA水平明显低于高脂组(P<0.05);香砂六君子汤干预后,大鼠肝脏SAA、PLTP和CETP基因m RNA水平显著降低(P<0.05或P<0.01),apo A1和LCAT基因m RNA水平显著升高(P<0.05或P<0.01),PON1 m RNA水平呈上升趋势,但无统计学意义。其中,香砂六君子高剂量组大鼠肝脏dy HDL及其RCT相关基因m RNA表达变化更为明显。6.香砂六君子汤对肝脏PON1、apo A1、SAA、PLTP、LCAT、CETP和CYP7A1蛋白表达的影响与正常对照组相比,高脂组和脾虚高脂组大鼠肝脏SAA、PLTP蛋白相对表达水平显著升高(P<0.05),apo A1、LCAT及CYP7A1蛋白相对表达水平水平显著降低(P<0.05或P<0.01),脾虚高脂组大鼠肝脏CETP蛋白相对表达水平明显升高(P<0.05);香砂六君子汤干预后,香砂六君子低剂量组大鼠肝脏PON1、CYP7A1蛋白相对表达水平显著升高(P<0.05),PLTP蛋白相对表达水平水平显著降低(P<0.05),香砂六君子高剂量组大鼠肝脏PON1、apo A1、LCAT和CYP7A1蛋白相对表达水平显著升高(P<0.05),SAA蛋白相对表达水平显著降低(P<0.05)。结论:1.香砂六君子汤能有效纠正脾虚高脂血症大鼠血脂紊乱及肝脏脂质沉积情况。2.香砂六君子汤可能通过影响dy HDL和RCT途径中相关基因及蛋白表达发挥纠正脂质紊乱的作用。