拟南芥UNC-93基因的功能研究

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mawenbo111
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
高温、低温、干旱和盐碱等非生物胁迫严重影响植物的生长发育,导致农作物的产量和品质降低。对植物逆境相关基因功能的研究,可为农作物的耐逆定向育种提供理论基础。植物存在可遗传的钾营养效率差异,提高农作物自身钾营养效率是目前农作物品质遗传改良的重要研究方向。本研究利用突变体、过量表达和遗传互补等技术手段对拟南芥UNC-93基因进行了功能鉴定,初步鉴定出在提高植物耐逆性、促进钾在植物体根冠部的运输和促进植株生长等方面发挥重要作用。主要结果如下:1.根据水稻高温胁迫下表达谱分析数据,共筛选了11个高温显著诱导表达基因,并从ABRC获得了其拟南芥同源基因的突变体。经PCR和RT-CR检测,共得到11个纯合突变体。2.通过对拟南芥11个突变体在高温、高盐、渗透和干旱等胁迫处理下耐受能力检测,筛选出2个对胁迫耐受能力显著降低的突变体unc-93-1和unc-93-2。unc-93-2株型矮小、开花发育较迟,而突变体unc-93-1在株型上与野生型的差异不及突变体unc-93-2明显。RT-PCR检测表明unc-93-1有UNC-93基因的3’端(T-DNA插入点之后)非全长转录产物表达,而unc-93-2却没有。3.UNC-93是钾离子通道的调控蛋白。UNC-93蛋白的跨膜结构分析表明其具有10个跨膜结构,预测为膜蛋白。亚细胞定位研究证实了UNC-93的确为膜蛋白。通过Real-time PCR检测,UNC-93基因的表达可被高温、高盐、甘露醇和ABA等处理诱导上调,但是对低温没有明显响应。正常生长条件下在各组织中均能检测到UNC-93的表达,但是根和幼苗中表达最强烈。经GUS报告基因转基因拟南芥材料的GUS组织化学染色发现,GUS在根、幼苗和叶脉中活性最强。4.构建了利用CaMV35S强启动子驱动UNC-93全长cDNA的过量表达载体和UNC-93基因3’端部分cDNA的过量表达载体,经农杆菌介导的花序浸泡法转化到野生型拟南芥(Col-0)中得到过量表达株系,转化到突变体UNC-93-1和UNC-93-2中得到遗传互补株系。5.突变体unc-93-1和unc-93-2在幼苗生长阶段都表现出明显降低对高温、高盐、干旱、甘露醇和ABA等处理的耐受能力,而UNC-93全长cDNA的过量表达能显著提高植株的耐盐性和耐旱性。在低温条件下,突变体lnc-93-1. unc-93-2.UNC-93过量表达和野生型没有明显差异。主要逆境相关基因RD29A. RD22、DREB2A.COR15A、COR47、HsfA2、Hsp101和Hsp70在胁迫处理前或者胁迫处理后突变体中表达量明显低于野生型,而UNC-93过量表达植株中部分基因的表达量却高于野生型。ABA响应基因AB11、AB12、MYB2和SnKR2.6等在突变体、UNC-93过量表达和野生型中的表达量具有显著差异。推测UNC-93可能是通过依赖于ABA途径来调控植物的耐逆性。在种子萌发阶段,unc-93-2和UNC-93过量表达种子的萌发相比野生型均受到高盐、渗透、高温和ABA的强烈抑制,而unc-93-1相比野生型却降低了对胁迫的敏感性。6.对突变体、UNC-93过量表达和野生型钾含量测定显示,突变体unc-93-1和unc-93-2冠部的钾含量都低于野生型。UNC-93过量表达植株只在低钾条件下钾含量才显著高于野生型,而在正常钾条件下,与野生型没有明显差异。根部钾含量各株系均无明显差异。正常生长条件下,unc-93-2的生长发育受到抑制,unc-93-1也表现出生长延迟现象,UNC-93过量表达植株相对野生型株型高大,根系发达。低钾条件下,与野生型和UNC-93过量表达相比,突变体unc-93-1和unc-93-2在幼苗生长上受到更严重抑制,而且黄化。在低钾低铵条件下,突变体unc-93-1和unc-93-2萌发后表现出子叶褐化、根弯曲多根毛等现象。7.遗传互补实验表明,当把UNc-93全长cDNA的过量表达载体转化到突变体unc-93-1和unc-93-2中,突变体unc-93-1和unc-93-2所具有的对高盐、渗透等胁迫的敏感性和unc-93-2的变异株型特征都得到明显的修复。而当UNC-93基因3’端部分cDNA的过量表达载体转化到unc-93-2以后,也能在一定程度上修复unc-93-2矮小的特征。
其他文献
<正>第二次朝美峰会以"无协议方式"落幕后,一个新的话题突显出来。特朗普和蓬佩奥在2月28日的记者会上爆出猛料:朝鲜"除了宁边核设施外,还有很多其他的设施"。而美国突然抛出
通过对数字化地图产品优越性的分析以及用户对数字化测绘产品—地形图、地籍图、房产图、管线图的需求,初步分析了数字地形图初始测绘方案的选取,对变更测量程序及全野外数字化测图技术作了简要介绍。
目的:探讨还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)对血小板的作用以及其发挥作用的可能机制。方法:在体外实验中,检测不同浓度的NADPH对由ADP(10μM)、凝血酶(0.05U/m L)或花
深海油压动力源是目前深海动力源常用的动力源形式。从深海油压动力源所用液压油出发,介绍了液压油黏度性质及其对液压系统的影响。重点分析了在深海高压、低温环境下,液压油
目的 探讨难治性心力衰竭继发肺部真菌感染的病原学情况,且加强预防控制措施,以降低该疾病的发生,控制病情进展。方法回顾性分析2011年1月至2014年1月40例难治性心力衰竭继发
植物的功能性状反映植物对生长环境的适应与响应,因此外界生物和非生物因素对植物功能性状及特征的演化会产生不同程度的影响。作为植物功能性状的重要组成部分,繁殖性状也受
<正> 目的:逍遥散加减治疗辨证为肝气郁结的妇科病证的疗效。方法:逍遥散加减治疗5种妇科病症。结果:逍遥散可用于多种妇科病的治疗。结论:逍遥散加减能治疗肝气郁结的妇
会议
目的 了解深圳市健康人群麻疹抗体水平,为消除麻疹制定针对性的策略和措施。方法 于2010年-2012年连续三年在深圳市选择不同年龄组健康人群作为监测对象,采用酶联免疫吸附试
介绍了大口径钢筒混凝土管(PCCP管)在南水北调工程天津一段供水管线中的施工、检测方面的情况,小结了若干值得重视的问题。
用电化学方法研究了在酸性环境中聚天冬氨酸(PASP)对45^#碳钢的缓蚀作用及影响因素。结果表明:PASP具有一定的缓蚀保护作用;缓蚀效率随添加PASP浓度增加而增大;当PASP含量达到10g/L