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目的:探讨还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)对血小板的作用以及其发挥作用的可能机制。方法:在体外实验中,检测不同浓度的NADPH对由ADP(10μM)、凝血酶(0.05U/m L)或花生四烯酸(0.5 m M)诱导的血小板聚集的作用,使用NADP+/NADPH试剂盒检测血小板内NADPH含量,初步探讨NADPH发挥作用的场所,并比较NAD+、NADH、NADP+和NADPH对由ADP(10μM)或凝血酶(0.05 U/m L)诱导的血小板聚集的抑制作用的强弱。在体内实验中,采用剪尾法测定NADPH对小鼠出血时间的影响,通过检测给予了NADPH的大鼠血液的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)和纤维蛋白原含量(FIB)来判定大鼠的凝血功能,采用氯化铁诱导的大鼠腹主动脉血栓形成模型来评价NADPH对血栓形成的影响,均以阿司匹林作为阳性药物对照。运用p38MAPK激活剂anisomycin和抑制剂SB203580来探究NADPH对血小板聚集的抑制作用是否与p38的磷酸化有关。结果:NADPH可呈剂量依赖性地抑制由ADP(10μM)或凝血酶(0.05 U/m L)诱导的血小板聚集,但对花生四烯酸(0.5 m M)诱导的血小板聚集无抑制作用。在检测血小板内NADPH的含量后发现,NADPH可能没有足够的时间进入血小板,提示NADPH可能主要是在血小板外发挥作用的。在比较NAD+、NADH、NADP+和NADPH对血小板聚集的抑制作用时,NADPH显示出最好的抑制作用。尾静脉给予NADPH可以短暂延长小鼠的出血时间,给予7.5 mg/kg的NADPH半小时后,小鼠的出血时间显著延长。阿司匹林则表现出更明显的延长出血时间的作用,在灌胃给予15 mg/kg的阿司匹林后,在观测的每个时间点,小鼠的出血时间均明显延长。NADPH和阿司匹林对大鼠的凝血时间均无影响。在氯化铁诱导的大鼠血栓形成模型中,提前给予NADPH的大鼠较之给予生理盐水的大鼠,表现出血栓形成时间的延长,而提前给予阿司匹林的大鼠在观测时间内均未形成稳定栓塞。在显微镜下观测受损段血管切片发现,较之给予生理盐水的大鼠,给予NADPH的大鼠血管内血栓结构松散且血栓数量较少,而提前给予阿司匹林的大鼠血管内血栓数量最少。在使用p38MAPK激活剂anisomycin和抑制剂SB203580探究p38MAPK在血小板聚集中的作用时,通过Western blot法检测到由ADP或凝血酶诱导聚集的血小板中,p38磷酸化水平明显升高,而p38激活剂Anisomycin能在一定程度上进一步增强p38的磷酸化水平,NADPH则可以显著抑制p38的磷酸化。p38抑制剂SB203580能显著抑制血小板的聚集,且NADPH对血小板聚集的抑制作用能被p38激活剂anisomycin在一定程度上逆转。结论:NADPH可以抑制由ADP或凝血酶诱导的血小板聚集,其机制可能与NADPH抑制p38磷酸化有关。NADPH能在一定程度上延长血栓形成时间,且对出凝血时间影响较小。这提示,NADPH可能成为预防心血管疾病的候选药物。