【摘 要】
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十字花科蔬菜是我国重要经济作物。随着全球气候变化和集约化生产,病毒病已成为危害我国蔬菜生产的主要病害,其中芜菁花叶病毒(TuMV)是侵染十字花科蔬菜的主要病毒之一,严重
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十字花科蔬菜是我国重要经济作物。随着全球气候变化和集约化生产,病毒病已成为危害我国蔬菜生产的主要病害,其中芜菁花叶病毒(TuMV)是侵染十字花科蔬菜的主要病毒之一,严重制约了我国十字花科蔬菜产业的健康可持续发展。实验室前期已定位克隆到了真核生物翻译起始因子eIF2Bβ基因是芥菜中抗TuMV的隐性抗病基因,本研究在此基础上以感病材料缩头种(STZ)为研究材料,探究了eIF2Bβ及基因对温度和ABA响应关系以及对病毒病发生的影响。同时,以K407为材料,通过CRISPR/Cas9基因编辑技术,研究了eIF2β基因调控植株生长的分子机制。本研究主要成果如下:1.环境对芜菁花叶病毒病发生的影响:研究表明芜菁花叶病毒病的发生受温度影响,依赖于eIF2Bβ基因的表达量。在28℃下,植株出现叶片畸形、褪绿坏死的典型症状,且eIF2Bβ基因的相对表达量和TuMVV的积累量达到了最高。此外,发现外源ABA能诱导eIF2Bβ基因的相对表达,预示ABA对TuMV发生具有一定的调控作用。2.eIF2Bβ 基因敲除突变体构建:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对甘蓝型油菜中的eIF2Bβ基因进行了敲除,经PCR鉴定和测序分析,成功获得了 eIF2Bβ(GSBRNA2T00057478001)基因敲除植株。将野生型和突变体置于相同的生长环境下培养,发现突变体均比野生型生长地更快,且不经过春化即可进入抽薹开花的阶段,表明eIF2Bβ调控植株的开花和生长过程。3.eIF2β基因调控油菜生长发育的机制:通过RNA-seq鉴定到多个野生型和突变体在生长发育过程中差异表达的基因,这些基因主要富集在光合作用、碳水化合物代谢和氨基酸的生物合成等过程,为解析eIF2Bβ基因调控植物生长发育的分子机制提供了重要依据。
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